Sécher les gels d’agarose. Bio-Rad Biotechnology Explorer

Voici des informations sur Biotechnology Explorer Digestion d'ADN du phage Lambda. Ce kit initie les élèves aux principes du génie génétique, notamment l'utilisation des enzymes de restriction et de l'électrophorèse sur gel agarose. Il permet d'estimer la taille des fragments d'ADN. Les enzymes EcoRI, PstI et HindIII sont utilisées pour digérer l'ADN du bactériophage lambda.

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Pour obtenir une archive permanente du gel avant qu’il ne soit séché, tracer le contour du gel

(y compris les puits et les bandes d’ADN) sur un morceau de papier ou d’acétate, prendre une photographie en utilisant un appareil de photo et une pellicule standard (système de documentation de gel Polaroïd standard de Bio-Rad, référence catalogue N°170-3742EDU) ou photocopier le gel coloré.

Séchage du gel d’agarose pour garder une trace permanente de l’expérience

Remarque : pour sécher le gel d’agarose, il faut utiliser un agarose de qualité analytique très résistant d’une formule spéciale de Bio-Rad. Les autres supports de gel peuvent ne pas être appropriés à cet effet.

Nous recommandons d’utiliser la pellicule de support de gel exclusive de Bio-Rad

(référence catalogue N°170-2984EDU) pour sécher les gels d’agarose. Retirer le gel d’agarose coloré de sa cuve de coloration et découper toutes les bandes non chargées avec un cutter ou une lame de rasoir. Placer le gel directement sur le côté hydrophile d’un morceau de pellicule de support de gel.

(L’eau formera des cordons sur le côté hydrophobe mais s’étalera sur le côté hydrophile de la pellicule). Centrer le gel sur la pellicule et chasser les bulles qui peuvent se former entre le gel et la pellicule. Placer la pellicule sur une serviette en papier et laisser le gel sécher en veillant à éviter une exposition directe à la lumière. Au fur et à mesure que le gel sèche, il se fixera sur la pellicule mais ne rétrécira pas. Si on le laisse sans intervenir sur la pellicule de support, le gel séchera complètement à la température ambiante au bout de 2 à 3 jours. Le résultat est une trace plate, transparente et durable de l’expérience.

Pellicule de support du gel

Remarque : éviter une exposition prolongée des gels séchés à la lumière directe pour éviter que la bande ne passe. Toutefois, les bandes d’ADN réapparaîtront si les gels séchés sont stockés dans le noir pendant 2 à 3 semaines après avoir passé.