Beckman Coulter CytoDiff Manuel du propriétaire

Guide système
Logiciel CytoDiff CXP
A99719AD
Mars 2017
Beckman Coulter, Inc.
250 S. Kraemer Blvd.
Brea, CA 92821 U.S.A.
Logiciel CytoDiff CXP
Guide système
Réf. A99719AD (Mars 2017)
Copyright © 2010-2017 Beckman Coulter, Inc.
Tous droits réservés.
Le logo Beckman Coulter, Beckman Coulter, CytoDiff,
Flow-Check, Flow-Set, Flow-Count et tetraCHROME sont
des marques commerciales de Beckman Coulter. Le logo
Beckman Coulter et Beckman Coulter sont des marques
déposées auprès de USPTO et SIPO.
Toutes les autres marques commerciales, marques de
service, produits ou services sont des marques
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www.beckmancoulter.com
Beckman Coulter Ireland, Inc.
Mervue Business Park, Mervue Galway, Ireland 353 91 774068
Historique des révisions
Ce document s’applique au dernier logiciel répertorié et versions supérieures. Lorsqu'une nouvelle version logicielle
modifie les informations de ce document, une nouvelle édition paraîtra sur le site Web Beckman Coulter. Pour les mises
à jour du marquage, voyez le site www.beckmancoulter.com et téléchargez la dernière version du manuel ou de l'aide en
ligne de votre instrument.
Version AA, première édition 10/2010
Logiciel CytoDiff CXP Version 1.0
Version AB, 10/2012
Logiciel CytoDiff CXP Version 2.0
Cette révision entraîne une révision majeure du manuel.
Édition AC, 3/2016
Version logicielle 2.0
Édition AD, 3/2017
Version logicielle 2.0
L’adresse suivante a été modifiée :
- Adresse du représentant européen autorisé
Remarque : Les modifications faisant partie de la révision la plus récente sont repérées par une barre de
modification dans la marge de gauche de la page.
A99719AD
iii
Historique des révisions
iv
A99719AD
Avis de sécurité
Avant d'utiliser l'instrument, lisez tous les manuels des produits et sollicitez le personnel formé de
Beckman Coulter. N'essayez pas d'exécuter une procédure avant d'avoir lu attentivement toutes les
instructions. Suivez systématiquement les recommandations figurant sur l'étiquette des produits et
celles du fabricant. En cas de doute sur ce que vous devez faire dans une situation quelconque,
contactez votre représentant Beckman Coulter local.
Beckman Coulter, Inc. incite fortement ses clients à suivre les consignes nationales de santé et de
sécurité telles que l'utilisation d'équipements de protection personnelle. Cela peut inclure, sans y
être limité, le port de lunettes de protection, de gants et d'un vêtement de laboratoire approprié lors
de l’utilisation ou de l'entretien de cet instrument ou de tout autre analyseur automatisé de
laboratoire.
Alertes de type Avertissement et Attention
AVERTISSEMENT
AVERTISSEMENT indique une situation potentiellement dangereuse qui, si elle
n'est pas évitée, peut entraîner la mort ou une blessure grave. Peut aussi être
utilisé pour indiquer la présence éventuelle de données erronées qui peuvent
entraîner un diagnostic incorrect.
ATTENTION
ATTENTION indique une situation potentiellement dangereuse qui, si elle n’est pas
évitée, peut entraîner des blessures légères ou modérées. Cette mention peut
aussi être utilisée pour alerter sur des pratiques dangereuses. Peut aussi être
utilisé pour indiquer la présence éventuelle de données erronées qui peuvent
entraîner un diagnostic incorrect.
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v
Avis de sécurité
Alertes de type Avertissement et Attention
AVERTISSEMENT
Risque de blessures corporelles si :
• Tous les capots, panneaux et portes ne sont pas fermés et fixés solidement
avant et pendant l'utilisation de l'instrument.
• L'intégrité des verrous de sécurité et des capteurs est compromise ;
• Les alarmes et les messages d'erreur de l'instrument ne sont pas pris en
compte ;
• Vous entrez en contact avec des pièces mobiles ;
• Vous ne maniez pas avec précaution des pièces cassées ;
• Les portes, les capots et les panneaux ne sont pas ouverts, fermés, retirés
et/ou replacés précautionneusement.
• Des outils inadaptés sont utilisés lors du dépannage.
Pour éviter toute blessure :
• Gardez tous les capots, panneaux et portes fermés et fixés solidement
pendant l’utilisation de l’instrument.
• Faites usage de toutes les fonctions de sécurité de l’instrument ;
• Tenez compte des alarmes et des messages d’erreur de l’instrument ;
• Tenez-vous à distance des pièces mobiles.
• Signalez toute pièce endommagée à votre représentant Beckman Coulter
local.
• Ouvrez/retirez et fermez/replacez les portes, capots et panneaux avec
précaution.
• Utilisez des outils adaptés lors du dépannage.
ATTENTION
L'intégrité du système peut être compromise et des pannes risquent de se
produire si :
• Cet équipement est utilisé d'une manière autre que celle spécifiée Utilisez cet
instrument selon les instructions des manuels du produit.
• vous installez un logiciel non autorisé par Beckman Coulter dans votre
ordinateur. N'utilisez l'ordinateur de votre système qu’avec des logiciels
agréés par Beckman Coulter.
• Vous installez un logiciel qui n'est pas un original protégé par copyright.
N’utilisez que des logiciels qui sont des versions d'origine protégées par
copyright afin d'éviter toute contamination par virus informatique.
vi
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Avis de sécurité
Alertes de type Avertissement et Attention
ATTENTION
Si vous avez acheté ce produit ailleurs que chez Beckman Coulter ou un
distributeur Beckman Coulter autorisé, et s'il ne fait pas l'objet d'un contrat de
maintenance Beckman Coulter, Beckman Coulter ne peut garantir que le produit a
bénéficié des toutes dernières révisions techniques obligatoires ou que vous
recevrez les bulletins d'information les plus récents concernant le produit. Si vous
avez acheté ce produit à un tiers et souhaitez obtenir d'autres informations à ce
sujet, contactez votre représentant Beckman Coulter local.
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vii
Avis de sécurité
Alertes de type Avertissement et Attention
viii
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Table des matières
Historique des révisions, iii
Avis de sécurité, v
Alertes de type Avertissement et Attention, v
Introduction, xv
Présentation, xv
Avant de commencer, xv
À propos de ce guide du système, xv
FC 500 avec logiciel CXP, xv
Conventions, xvi
Graphiques, xvi
Symboles de sécurité, xvi
CHAPITRE 1:
Utilisation et fonction, 1-1
Présentation, 1-1
Utilisation prévue, 1-1
Principes de test, 1-2
Auto-configuration du logiciel - Aperçu de l'installation, 1-3
Vue d'ensemble des protocoles, 1-4
Protocoles déverrouillés (protocoles modifiés par
l'utilisateur), 1-4
CHAPITRE 2:
Installation du logiciel/protocoles, 2-1
Présentation, 2-1
Avant l'installation du logiciel, 2-1
Installation du logiciel, 2-1
Mise à niveau à partir d'une version antérieure du logiciel CytoDiff
CXP, 2-2
Supprimer la version existante v1.0 du logiciel CytoDiff CXP, 2-2
Modifier ou réparer la version de CytoDiff CXP actuellement
installée, 2-4
ix
Table des matières
Première installation, 2-5
Le logiciel de connexion Microsoft .NET n'a pas été installé, 2-5
Le logiciel de connexion Microsoft .NET est déjà installé, 2-7
Irrégularités d'installation, 2-10
Installation incomplète, 2-10
Annulation de l'installation, 2-11
Installation interrompue, 2-11
Protocoles, panels et applications, 2-12
Auto-configuration : Protocoles et applications CytoDiff, 2-12
Création de rapport de panel, 2-14
Créer un nouveau panel, 2-14
Format du fichier modèle de panel, 2-24
CHAPITRE 3:
Analyse des échantillons, 3-1
Présentation, 3-1
Procédure de coloration et contrôle de la qualité, 3-1
Procédure d’analyse des échantillons, 3-1
Le protocole de données cytoDiffCXP.pro, 3-1
Réglage de région par le logiciel CytoDiff CXP, 3-9
Détection de l'interférence de cellules autres que des GB, 3-10
Définition d'une région automatisée, 3-12
Mesures supplémentaires pour prendre en charge
l'analyse, 3-21
CHAPITRE 4:
Caractéristiques de performance, 4-1
Présentation, 4-1
Valeurs attendues, 4-1
Linéarité, 4-2
Exactitude de la méthode, 4-2
Précision, 4-4
CHAPITRE 5:
Limitations du système/précautions, 5-1
Limitations du système, 5-1
Précautions, 5-1
ANNEXE A:
Dépannage, A-1
Présentation, A-1
Messages d'erreur CytoDiff CXP, A-1
ANNEXE B:
Fenêtres pour le protocole cytoDiff CXP.pro, B-1
Présentation, B-1
Nom et définition de la fenêtre, B-1
x
Table des matières
Références
Beckman Coulter, Inc.
Accord de licence Utilisateur final
Documents connexes
xi
llustrations
llustrations
xii
3.1
Protocole cytoDiffCXP.pro par défaut, 3-2
3.2
Protocole cytoDiffCXP.pro après exécution du logiciel CytoDiff
CXP, 3-3
3.3
Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page
1), 3-4
3.4
Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page
2), 3-5
3.5
Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page
3), 3-6
3.6
Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page
4), 3-7
3.7
Légende du protocole cytoDiffCXP.pro, 3-8
3.8
Logique d'analyse des échantillons, 3-10
3.9
Interférences ne correspondant pas à des GB sur l'histogramme
CD45/CD36, 3-11
3.10
Régions Ra et Rb pour la détection des interférences ne
correspondant pas à des GB, 3-11
3.11
Régions Ra et Rb en forme de triangle par défaut pour une faible
interférence ne correspondant pas à des GB, 3-12
3.12
Classificateurs CytoDiff sur les histogrammes 2D, 3-13
3.13
Classification des lymphocytes B ou des lymphocytes B
immatures à l'aide de l'histogramme CD19/SS, 3-14
3.14
Classification des GB par séparation des débris de GR et des
plaquettes à l'aide de l'histogramme CD45/CD36, 3-14
3.15
Classification des neutrophiles immatures à l'aide de
l'histogramme CD16/SS, 3-15
3.16
Classification des monocytes et/ou des monocytes immatures à
l'aide de l'histogramme CD36/CD2+CRTH2, 3-15
3.17
Classification des éosinophiles et/ou des granulocytes
immatures à l'aide de l'histogramme CD16/SS, 3-16
3.18
Classification des lymphocytes T et/ou des cellules NK à l'aide
de l'histogramme CD45/SS, 3-16
3.19
Classification des lymphocytes immatures non-T et non-B à
l'aide de l'histogramme CD45/CD2+CRTH2., 3-17
3.20
Classification des basophiles et des lymphocytes T immatures à
l'aide de l'histogramme SS/FS, 3-17
3.21
Classification des lymphocytes T et lymphocytes B immatures
llustrations
ou très précoces à l'aide de l'histogramme CD45/SS, 3-18
3.22
Classification des éosinophiles et des monocytes immatures à
l'aide de l'histogramme CD45/CD2+CRTH2., 3-18
3.23
Classification des monocytes très précoces ou très immatures à
l'aide de l'histogramme CD45/SS, 3-19
3.24
Classification de monocytes CD16- ou CD16+ à l'aide de
l'histogramme CD16/SS, 3-20
3.25
Classification des lymphocytes T et des cellules NK CD16- ou
CD16+ à l'aide de l'histogramme CD16/SS, 3-20
A.1
Erreur de protocole incorrect, A-3
A.2
En-tête de page de flux indiquant le type d'erreur, A-3
A.3
Résultats de panel CytoDiff après une détection d'erreur, A-4
xiii
Tableaux
Tableaux
xiv
1.1
Paramètres hématologiques 10 IVD fournis par le système
CytoDiff, 1-1
1.2
Applications d'auto-configuration, 1-3
1.3
Applications d'auto-configuration CE et protocoles et fichiers
associés, 1-4
2.1
Protocoles et applications : Auto-configuration, 2-12
2.2
Protocoles et panels CytoDiff, 2-12
2.3
Fichiers installés, 2-13
3.1
Paramètres CytoDiff et légende correspondante, 3-8
3.2
CytoDiff pour un usage avec les paramètres de laboratoire
uniquement., 3-9
3.3
Mesure de l'intervalle de confiance des régions, 3-21
3.4
Indice de normalité pour des populations choisies, 3-21
3.5
Mesures diverses, 3-22
3.6
Mesures de base des populations (Intervalle de confiance,
IC), 3-22
4.1
Sang total normal (% GB), 4-1
4.2
Régression linéaire, 4-2
4.3
Equivalence réactif, 4-2
4.4
Précision, 4-4
A.1
Messages d'erreur CytoDiff affichés dans la boîte de dialogue
Résultats de l’analyse, A-1
B.1
Fenêtres CytoDiff CXP pour le protocole cytoDiffCXP.pro, B-1
B.2
Région, histogramme et fenêtres respectives du protocole
CytoDiff, B-3
B.3
Calcul des paramètres CytoDiff, B-4
Introduction
Présentation
Ce chapitre contient les sections suivantes :
• Avant de commencer
• Conventions
• Graphiques
• Symboles de sécurité
Avant de commencer
À propos de ce guide du système
Le guide du système logiciel CytoDiff CXP donne des informations de référence et des instructions
sur la manière d'utiliser le système CytoDiff.
Utilisez ce guide avec la notice des réactifs. Consultez la Réf. A84341.
REMARQUE Ce guide du SYSTÈME est fourni avec le CD-ROM du logiciel. Conservez soigneusement ce
guide et le CD-ROM pour référence ultérieure et ne les jetez pas.
FC 500 avec logiciel CXP
Le logiciel de cytométrie FC 500 CXP doit être installé sur votre poste de travail. Le cytomètre de flux
doit avoir le bloc de filtre de couleur unique en place, avant de lancer le logiciel.
A99719AD
xv
Introduction
Conventions
Conventions
Ce guide utilise les conventions suivantes :
• Dans tout ce manuel, le terme CytoDiff CXP est employé pour le panel CytoDiff (Réf. A84341),
l'algorithme CytoDiff et le logiciel FC 500 CXP.
• Dans tout ce manuel, le terme cytoDiffCXP fait référence au protocole et aux noms de fichiers.
• Les caractères gras indiquent une option logicielle, comme Cytomètre.
• Les caractères en italique indiquent le texte d'écran affiché sur l'instrument, comme
Preparing Samples (Préparation des échantillons en cours).
• La police Courier indique un texte que vous devez saisir à l'aide du clavier.
• Les icônes/boutons permettant de sélectionner des fonctions sur l'écran sont indiqués dans le
texte.
Exemple :
•
.
File (Fichier) > Save (Enregistrer) indique que vous devez utiliser la souris pour
sélectionner l'élément Save (Enregistrer) dans le menu File (Fichier).
• Les termes « écran » et « fenêtre » sont utilisés de manière interchangeable.
• PDF est un type de fichier de données portable pouvant être lu par Adobe® Acrobat® Reader.
• XLS est un fichier Microsoft® Excel.
Graphiques
Tous les graphiques, y compris des captures d'écran et des sorties papier ne sont utilisés qu'à titre
d'illustration ; ils ne peuvent pas être utilisés à d'autres buts.
Symboles de sécurité
Les symboles de sécurité vous avertissent de conditions risquant de présenter un danger. Ces
symboles, accompagnés de leur texte, s’appliquent à des procédures spécifiques et apparaissent
quand ils sont nécessaires au fil de ce manuel.
Symbole
xvi
Condition d’avertissement
Opération
Risque biologique. Considérez tous les produits
utilisés (prélèvements, réactifs, contrôles, calibrants,
etc.) et toutes les zones avec lesquelles ces produits
entrent en contact comme étant potentiellement
infectieux.
Portez les protections standard de
laboratoire et respectez les normes
de sécurité en vigueur lors de la
manipulation de tout équipement
ou matériau de laboratoire.
Risque dans certaines conditions. Danger possible
dans certaines conditions spécifiques.
Lisez attentivement les
informations fournies lorsque vous
voyez ce symbole.
A99719AD
CHAPITRE 1
Utilisation et fonction
Présentation
Ce chapitre contient les sections suivantes :
• Utilisation prévue
• Principes de test
Utilisation prévue
Le système CytoDiff consiste en les éléments suivants :
• Le Cytomics FC 500 avec logiciel CXP
• Le logiciel CytoDiff CXP pour Cytomics FC 500 contient l'algorithme d'analyse automatisée
CytoDiff
• Panel CytoDiff (CD36-FITC/ CD2-PE/ CD294 (CRTH2)-PE/ CD19-ECD/ CD16-PC5/ CD45-PC7)
-un réactif à 6 anticorps monoclonaux et 5 couleurs pour un usage diagnostique in vitro sur des
spécimens de sang total
• Réactifs de contrôle de qualité
Le Système CytoDiff est conçu pour fournir une différentielle cytométrique proportionnelle en
10 parties sur le sang total. Une numération en valeur absolue est obtenue lorsque les pourcentages
fournis par le système CytoDiff sont combinés à un globule blanc (GB) externe par l'intermédiaire
du générateur de rapport FC 500 ou tout autre outil tiers adapté. Le logiciel fournit une routine
d'auto-configuration pour une compensation appropriée. Le CytoDiff CXP est destiné à être utilisé
sur un instrument de cytométrie en flux FC 500 Beckman Coulter avec la version 2.2 ou ultérieure
du logiciel CXP.
Le système détermine les paramètres hématologiques suivants (pourcentage) dans des spécimens
de sang total :
Tableau 1.1 Paramètres hématologiques 10 IVD fournis par le système CytoDiff
A99719AD
Paramètre hématologique (%GB)
Description
Lymphocyte B
Pourcentage de lymphocytes B
Total des lymphocytes T/NK
Pourcentage de lymphocytes T et de cellules NK
1-1
Utilisation et fonction
Principes de test
Tableau 1.1 Paramètres hématologiques 10 IVD fournis par le système CytoDiff (Suite)
Paramètre hématologique (%GB)
Description
Total des lymphocytes
Somme des lymphocytes B et des lymphocytes T/cellules NK
Total des monocytes
Pourcentage des monocytes
Neutrophiles matures
Pourcentage des neutrophiles matures
Total des neutrophiles
Somme des neutrophiles matures et des granulocytes immatures
Éosinophiles
Pourcentage des éosinophiles
Basophiles
Pourcentage des basophiles
Granulocytes immatures
Pourcentage des granulocytes immatures
Total des blastes
Pourcentage des cellules de type blaste
Ce réactif est destiné à être utilisé sur un cytomètre en flux FC 500 équipé d'un laser de 488 nm
capable de détecter la diffusion de la lumière (diffusion vers l'avant - FS, et diffusion latérale - SS) et
cinq couleurs d'émission de fluorescence dans les plages suivantes : 504–541 nm, 568–590 nm, 610–
635 nm, 660–680 nm et 710–800 nm.
Reportez-vous à la documentation FC 500 suivante où figurent des instructions pour le réglage de la
compensation de fluorescence et des tensions du tube photomultiplicateur (PMT) avant l'analyse.
Référence
Type de document
175570
Référence
175572
Procédures particulières et dépannage
177652
Démarrage
624923
Manuel d'utilisation
Principes de test
Ce test est basé sur la capacité d'anticorps monoclonaux particuliers de se lier aux déterminants
antigéniques exprimés par les leucocytes.
Une coloration spécifique des leucocytes est effectuée par incubation de l'échantillon avec les
réactifs du panel CytoDiff. Les globules rouges (GR) sont alors éliminés par lyse et les leucocytes, qui
n'en sont pas affectés, sont analysés par cytométrie de flux.
Le cytomètre de flux mesure la diffusion de la lumière et la fluorescence des cellules. Il rend possible
la délimitation de la population à l'étude au sein de la fenêtre électronique définie sur un
histogramme qui correspond à différents paramètres.
Une série d'histogrammes biparamétriques sont utilisés au stade de gating. La fluorescence des
cellules délimitées est analysée de manière à distinguer les évènements colorés positifs de ceux qui
ne le sont pas.
La stratégie de gating permet la détection des leucocytes circulants qui sont de plus par
10 paramètres. Les résultats sont exprimés sous forme de pourcentage d'évènements GB.
1-2
A99719AD
Utilisation et fonction
Principes de test
Auto-configuration du logiciel - Aperçu de l'installation
Le logiciel CytoDiff comprend : panels d'analyse, protocoles d'analyse, applications d'autoconfiguration et protocoles d'auto-configuration.
L'application d'auto-configuration du panel CytoDiff CXP consiste en des protocoles qui
standardisent automatiquement le cytomètre, ajustent les réglages de compensation et modifient
les réglages du cytomètre afin de tester les protocoles. Reportez-vous au Tableau 1.2 où figurent des
informations particulières sur la fonction de chacun de ces protocoles.
Tableau 1.2 Applications d'auto-configuration
A99719AD
TYPE DE
PROTOCOLE
NOM DU
PROTOCOLE
NOM DE FICHIER
Standardisation
AS
AS
du réglage du
flux (Flow-Set)
cytoDiffCXP
FL1
AS
Compensation
cytoDiffCXP_FL1
FL2
AS
Compensation
cytoDiffCXP_FL2
FL3
AS
Compensation
cytoDiffCXP_FL3
FL4
AS
Compensation
cytoDiffCXP_FL4
FL5
AS
Compensation
cytoDiffCXP_FL5
OBJECTIF
1er protocole de l'application d'autocytoDiffCXP_STAND.pro configuration AS du CytoDiff. Il crée
l'entrée initiale dans le fichier de
référence et écrit les tensions et
réglages du gain après ajustement pour
cibler des valeurs en fonction d'une
combinaison Flow-Set et fluorosphère
Flow-Set 770.
AS cytoDiffCXP_FL1.pro
2e protocole de l'application d'autoconfiguration AS du CytoDiff. Il effectue
une compensation matricielle complète
en calculant les répercutions de FL1 sur
les autres paramètres.
AS cytoDiffCXP_FL2.pro 3e protocole de l'application d'autoconfiguration AS du CytoDiff. Il effectue
une compensation matricielle complète
en calculant les répercutions de FL2 sur
les autres paramètres.
AS cytoDiffCXP_FL3.pro 4e protocole de l'application d'autoconfiguration AS du CytoDiff. Il effectue
une compensation matricielle complète
en calculant les répercutions de FL3 sur
les autres paramètres.
AS cytoDiffCXP_FL4.pro 5e protocole de l'application d'autoconfiguration AS du CytoDiff. Il effectue
une compensation matricielle complète
en calculant les répercutions de FL4 sur
les autres paramètres.
AS cytoDiffCXP_FL5.pro 6e protocole de l'application d'autoconfiguration AS du CytoDiff. Il effectue
une compensation matricielle complète
en calculant les répercutions de FL5 sur
les autres paramètres.
1-3
1
Utilisation et fonction
Principes de test
Tableau 1.2 Applications d'auto-configuration (Suite)
TYPE DE
PROTOCOLE
NOM DU
PROTOCOLE
NOM DE FICHIER
OBJECTIF
Fichier réglages
AS cytoDiffCXP
AS cytoDiffCXP
settings
settings.pro
• Contient les tensions et réglage du
gain de Flow-Set.
• Les valeurs de compensation sont
additionnées lorsque les cinq
protocoles de compensation sont
réalisés dans l'application.
• Le fichier des réglages est utilisé
avec tous les protocoles de
vérification au sein des applications
CytoDiff et pour un usage avec tous
les panels CytoDiff.
• Chargement de ces paramétrages
dans le protocole choisi.
As cytoDiffCXP
AS cytoDiffCXP.pro
Fichier
vérification
Vérification
Tableau 1.3 Applications d'auto-configuration CE et protocoles et fichiers associés
NOM DE L'APPLICATION
NOM DE FICHIER ADF
OBJECTIF/PROTOCOLES CONTENUS
AS CytoDiff
AS CytoDiff.adf
Application d'auto-configuration utilisée pour
procéder à la configuration à l'aide
d'échantillons de sang normal comme tubes
de vérification. L'application contient :
AS cytoDiffCXP
AS cytoDiffCXP settings
AS cytoDiffCXP_FL1
AS cytoDiffCXP_FL2
AS cytoDiffCXP_FL3
AS cytoDiffCXP_FL4
AS cytoDiffCXP_FL5
AS cytoDiffCXP
Vue d'ensemble des protocoles
Protocoles déverrouillés (protocoles modifiés par l'utilisateur)
Les protocoles déverrouillés sont également appelés Protocoles modifiés par l’utilisateur car ils
peuvent être modifiés. L'application CytoDiff propose un protocole déverrouillé. Lorsque les
résultats générés par l'algorithme sont modifiés par intervention de l'utilisateur (réglage manuel
des méthodes de gating), il vous appartient de régler correctement les régions.
1-4
A99719AD
CHAPITRE 2
Installation du logiciel/protocoles
Présentation
Ce chapitre contient les sections suivantes :
• Avant l'installation du logiciel
• Installation du logiciel
• Protocoles, panels et applications
Avant l'installation du logiciel
Avant d'installer le logiciel CytoDiff CXP, vérifiez les points suivants :
• Le logiciel CXP Cytometer (Version 2.2 ou ultérieure) est installé sur le système de cytométrie
de flux FC 500.
• Le CD-ROM du logiciel CytoDiff CXP est disponible.
• Le cytomètre de flux FC 500 est configuré avec un laser de 488 nm capable de détecter l'émission
de fluorescence 5 couleurs qui est détectable dans les plages suivantes :
504–541 nm, 568–590 nm, 610–635 nm, 660–680 nm et 710–800 nm.
Installation du logiciel
Composants requis :
• Le logiciel CXP Cytometer doit déjà être installé.
• Vérifiez que le logiciel CXP Cytometer n'est pas activé.
Suivez cette procédure pour installer le logiciel CytoDiff CXP sur un système de cytométrie de flux
FC 500.
Le logiciel CytoDiff CXP active le processus d'installation en vérifiant si le logiciel hôte, le logiciel
CXP, est actuellement installé.
A99719AD
2-1
Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
Pour mettre à niveau, supprimer ou modifier/réparer le logiciel CytoDiff CXP déjà installé,
consultez :
• Mise à niveau à partir d'une version antérieure du logiciel CytoDiff CXP
• Supprimer la version existante v1.0 du logiciel CytoDiff CXP
• Modifier ou réparer la version de CytoDiff CXP actuellement installée
Pour une première installation, si le logiciel de connexion Microsoft .NET n'est pas installé,
consultez :
• Le logiciel de connexion Microsoft .NET n'a pas été installé
Pour une première installation, si le logiciel de connexion Microsoft .NET est déjà installé,
consultez :
• Le logiciel de connexion Microsoft .NET est déjà installé
Pour résoudre tout problème d'irrégularités d'installation, consultez :
• Installation incomplète
• Annulation de l'installation
• Installation interrompue
Mise à niveau à partir d'une version antérieure du logiciel CytoDiff CXP
Pour une mise à niveau à partir d'une installation existante, il est nécessaire de désinstaller la
version existante avant d'installer la nouvelle version. Si le cytomètre est équipé d'une version
antérieure du logiciel CytoDiff CXP, le message suivant apparaît :
1
Sélectionnez OK pour quitter le programme de configuration.
2
Désinstallez la version antérieure du logiciel CytoDiff CXP et retentez l'installation.
Supprimer la version existante v1.0 du logiciel CytoDiff CXP
Il est nécessaire de supprimer la version existante du logiciel CytoDiff CXP avant d'installer la
nouvelle version v2.0. Pour supprimer la version existante 1.0, suivez les étapes suivantes :
2-2
A99719AD
Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
1
2
Sélectionnez le bouton Microsoft Windows Start (Démarrer) > Settings (Paramètres) > Control
Panel (Panneau de contrôle) > l'icône Add/Remove Programs (Ajouter/supprimer des
programmes) et sélectionnez CytoDiff CXP Software (Logiciel CytoDiff CXP).
Sélectionnez Remove (Supprimer).
REMARQUE Vérifiez que le logiciel d'analyse CXP Cytometer n'est pas activé. Si le logiciel CXP est en
cours d'exécution, la suppression ne sera effective qu'une fois le logiciel CXP fermé.
3
A99719AD
Suivez les instructions qui apparaissent à l'écran.
2-3
2
Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
4
5
La fenêtre Uninstall Complete (Désinstallation terminée) apparaît dès que le programme a été
supprimé.
Sélectionnez Finish (Terminer) pour achever le processus de désinstallation et quitter le
program de configuration.
Modifier ou réparer la version de CytoDiff CXP actuellement installée
Si le logiciel CytoDiff CXP a déjà été installé, la fenêtre CytoDiff CXP Software - InstallShield Wizard
(Logiciel CytoDiff CXP - Assistant InstallShield) apparaît à l'écran lorsque vous insérez le CD-ROM
dans le lecteur CD. Vous avez le choix entre les options suivantes :
• Modify (Modifier) - pour ajouter de nouvelles fonctions de programme à la version actuelle ou
pour sélectionner des fonctions actuellement installées pour les supprimer.
• Repair (Réparer) - pour réinstaller toutes les fonctions de programme ayant déjà été installées
précédemment.
• Remove (Supprimer) - pour supprimer les fonctions installées.
2-4
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Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
1
Sélectionnez Modify (Modifier), Repair (Réparer) ou Remove (Supprimer).
2
Sélectionnez Next (Suivant) pour achever la fonction sélectionnée.
3
Suivez les instructions qui apparaissent à l'écran.
Première installation
Le logiciel de connexion Microsoft .NET n'a pas été installé
Si le logiciel de connexion Microsoft .NET n'a pas encore été installé, le logiciel d'installation
CytoDiff CXP procédera à l'installation. Il est nécessaire de suivre ces instructions pour une
installation correcte du logiciel CytoDiff CXP.
1
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Introduire le disque d'installation du logiciel CytoDiff CXP dans le lecteur CD-ROM.
2-5
2
Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
2
Un écran Preparing to Install (Préparation pour l'installation) apparaît lorsque l'assistant
InstallShield détermine que le système est prêt à accepter l'installation du logiciel de connexion
Microsoft .NET. Suivez les instructions qui apparaissent à l'écran.
REMARQUE Lors de la première installation du logiciel CytoDiff CXP (avant l'installation du logiciel de
connexion Microsoft.Net sur le système cible), sélectionner le bouton Cancel (Annuler) n'aura aucun
effet.
3
Une fois la configuration Dot Net Framework terminée, une réinitialisation obligatoire du
système doit être effectuée. Sélectionnez Restart (Redémarrer) pour réinitialiser le système.
L'installation se poursuivra et la fenêtre Welcome to the InstallShield Wizard for cytoDiffCXP
Software (Bienvenue sur l'assistant InstallShield du logiciel cytoDiffCXP) s'affiche. Voir l'étape
1 de la rubrique Le logiciel de connexion Microsoft .NET est déjà installé.
Continuez pour suivre les instructions de la rubrique Le logiciel de connexion Microsoft .NET est
déjà installé.
2-6
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Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
Le logiciel de connexion Microsoft .NET est déjà installé
1
2
3
Introduire le disque d'installation du logiciel CytoDiff CXP dans le lecteur CD-ROM.
Sélectionnez Next (Suivant) sur l'écran de bienvenue pour passer à l'installation du logiciel
CytoDiff CXP et suivez les instructions qui apparaissent à l'écran.
Lisez l'accord de licence.
Sélectionnez Yes (Oui) pour accepter les termes de l'accord de licence et continuer
l'installation. Ne sélectionnez le bouton Print (Imprimer) que si vous souhaitez imprimer
l’accord de licence.
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2-7
2
Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
4
5
2-8
Sélectionnez Next (Suivant) pour commencer à copier les fichiers. Le répertoire d'installation
sera placé dans le même répertoire que le logiciel CXP.
L'écran Setup Status (État de configuration) indique les fichiers qui sont copiés vers
l'ordinateur.
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Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
6
Si le logiciel CXP est en cours d'exécution, la boîte de dialogue Files in Use (Fichiers en cours
d'utilisation) apparaît. Patientez et suivez les instructions qui apparaissent à l'écran. Fermez le
logiciel CXP et sélectionnez Retry (Réessayer) pour poursuivre l'installation.
REMARQUE Pour arrêter le processus d'installation, sélectionnez Exit (Quitter).
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2-9
2
Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
7
L'installation est terminée une fois que tous les fichiers ont été copiés.
Sélectionnez Finish (Terminer) pour fermer la fenêtre.
8
Lorsque l'installation est terminée, conservez soigneusement le CD-ROM.
Irrégularités d'installation
Installation incomplète
Si le logiciel CXP n'a pas été précédemment installé, le message suivant apparaît. Suivez les
instructions qui apparaissent à l'écran.
2-10
1
Sélectionnez OK pour quitter le programme de configuration.
2
Contactez votre administrateur système et téléchargez le logiciel CXP.
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Installation du logiciel/protocoles
Installation du logiciel
Annulation de l'installation
Si le bouton Cancel (Annuler) est sélectionné à n'importe quel moment du processus d'installation,
le message Setup (Configuration) apparaît.
Sélectionnez NO (NON) pour continuer l'installation
-OUSélectionnez YES (OUI) pour confirmer l'annulation.
Installation interrompue
Si l'installation est interrompue à n'importe quel moment du processus d'installation et n'est donc
pas terminée, l'écran InstallShield Wizard (Assistant InstallShield) apparaît.
Sélectionnez Finish (Terminer) pour quitter le programme de configuration.
A99719AD
2-11
2
Installation du logiciel/protocoles
Protocoles, panels et applications
Protocoles, panels et applications
Le protocole cytoDiffCXP.pro se trouve dans le dossier des protocoles Common/cytoDiffCXP
(acquisition). Le panel CytoDiff CXP doit être d'abord créé. Reportez-vous à la section Création de
rapport de panel.
Auto-configuration : Protocoles et applications CytoDiff
Tableau 2.1 Protocoles et applications : Auto-configuration
Nom de définition de
l'application
Nom des protocoles
Commentaire/usage
AS CytoDiff CXP
AS cytoDiffCXP.pro
[AS cytoDiffCXP.adf]
AS cytoDiffCXP.pro
AS cytoDiffCXP settings.pro
AS cytoDiffCXP.pro
A utiliser pour configurer
automatiquement l'instrument
pour CytoDiff
Tableau 2.2 Protocoles et panels CytoDiff
Nom du profil
Nom du protocole
Comment.
cytoDiffCXP Assay.pnl
cytoDiffCXP.pro
Protocole pour analyse CytoDiff
Après installation du logiciel CytoDiff CXP, les fichiers suivants sont installés :
2-12
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Installation du logiciel/protocoles
Protocoles, panels et applications
Tableau 2.3 Fichiers installés
Nom du fichier
Description
exz1.dll
DLL d'algorithme d'analyse BCI pour le
logiciel cytoDiffCXP.
BeckmanCoulter.InfFile.dll
Dependency DLLs for exz1.dll.
AlgorithmAdaptor.dll
BeckmanCoulter.Algorithms.Algorithm.dll
BeckmanCoulter.Algorithms.Algorithm.Interfaces.dll
BeckmanCoulter.Algorithms.Cytometry.AlgorithmUtilities.dll
BeckmanCoulter.Algorithms.Hematoflow.CytoDiff.Cxp.dll
BeckmanCoulter.Algorithms.Hematoflow.CytoDiff.Core.dll
Log4net.dll
cytoDiffCXP.CHM
Manuel du logiciel cytoDiffCXP.
cytoDiffCXP Panel Creation Instructions.pdf
manuel d'instructions pour la création de
panel cytoDiffCXP
Allow cytoDiffCXP panel report.exe
Fichier exécutable BCI.
cytoDiffCXP.1
Fichier de support du panel cytoDiffCXP.
AS cytoDiffCXP.adf
Protocoles d'auto-configuration
cytoDiffCXP.
AS cytoDiffCXP.pro
AS cytoDiffCXP settings.pro
AS cytoDiffCXP_FL1.pro
AS cytoDiffCXP_FL2.pro
AS cytoDiffCXP_FL3.pro
AS cytoDiffCXP_FL4.pro
AS cytoDiffCXP_FL5.pro
AS cytoDiffCXP_STAND.PRO
cytoDiffCXP.pro
Protocole d'acquisition cytoDiffCXP.
cytoDiffCXP Assay.pnl
Fichier du panel d'analyse cytoDiffCXP.
cytoDiffCXP Assay.cpf
Fichier de configuration du panel d'analyse
cytoDiffCXP.
REMARQUE Avant la première installation du logiciel CytoDiff CXP, une version initiale non fonctionnelle de
l'algorithme d'analyse DLL (EXZ1.dll) du logiciel CytoDiff CXP peut être présente dans le dossier
d'installation. Lors de l'installation du logiciel CytoDiff CXP, cette version préliminaire de EXZ1.dll sera
écrasée.
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2-13
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
Création de rapport de panel
Utilisez cette procédure lors de la création de rapports de panel CytoDiff CXP à partir du fichier
modèle. Des rapports de panel CytoDiff CXP devront être créés à chaque fois qu'une nouvelle version
du logiciel CytoDiff CXP est installée, afin de garantir la cohérence avec la base de données du panel.
Composants requis :
• Pour créer le rapport de panel CytoDiff CXP, le logiciel CytoDiff CXP doit être installé.
• Vérifiez que le logiciel d'analyse CXP Cytometer est activé.
Créer un nouveau panel
1
2
2-14
Dans le dossier CXP,
exécuter ce fichier.
le fichier nommé : Allow cytoDiffCXP panel report.exe pour
Le message suivant apparaît. Ne sélectionnez PAS OK pour le moment.
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Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
3
4
5
6
7
l'icône du cytomètre CXP sur votre bureau.
Ouvrez une session avec votre identifiant.
Sélectionnez File (Fichier) > New (Nouveau) > New Panel (Nouveau panel) pour activer le Panel
Wizard (Assistant de panel) et créer un fichier modèle.
Apportez les modifications suivantes sur la première page du New Panel Wizard (Assistant de
nouveau panel).
Entrez le nom du panel qui est créé dans le champ Panel Name (Nom du panel).
REMARQUE Pour cet exemple précis, Mon nom de panel est utilisé.
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2-15
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
8
9
Sélectionnez le chiffre 1 dans le champ No. of Tests (Nombre de tests) car ceci est une panel à
un tube.
Cochez le champ Export the results of this panel to the Report Generator (exporter les résultats
de ce panel vers le générateur de rapport) pour initier un fichier de rapport de panel clinique
portant le même nom que le panel.
10 Sélectionner Next (Suivant).
2-16
A99719AD
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
11 Sélectionnez le bouton parcourir
dans la fenêtre Protocol Settings (Paramètres de
protocole) et recherchez le dossier Acquisition Protocol (Protocole d'acquisition).
Exemple : C:\CXP\Users\admin\Acquisition Protocol
12 Ouvrez le dossier Users (Utilisateurs) pour afficher la liste des utilisateurs.
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2-17
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
13 Ouvrez le dossier Admin pour accéder au dossier Acquisition Protocol (Protocole d'acquisition).
14 Ouvrez le dossier Acquisition Protocol (Protocole d'acquisition) pour accéder au dossier
cytoDiffCXP.
2-18
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Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
15 Ouvrez le dossier cytoDiffCXP pour accéder au protocole cytoDiffCXP.pro.
16 Ouvrez le fichier de protocole cytoDiffCXP.pro.
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2-19
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
17 Décochez le champ Use Instrument Settings (Utiliser les paramètres de l'instrument) dans la
zone Protocol Settings (Paramètres du protocole). Ceci désactive la section Instrument Settings
(Paramètres de l'instrument) de l'assistant de panel.
18 Utilisez le bouton parcourir
dans la zone Instrument Settings (Paramètres de
l'instrument) pour sélectionner le fichier qui comprend les paramètres.
2-20
A99719AD
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
19 Sélectionnez le fichier de paramètres approprié dans la fenêtre Acquisition Protocol (Protocole
d'acquisition). Exemple : cette action sélectionnera le fichier de paramètre AS cytoDiffCXP
settings.pro dans le dossier Admin.
20 Ouvrez le dossier Admin pour accéder au dossier Acquisition Protocol (Protocole d'acquisition).
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2-21
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
21 Ouvrez le dossier Acquisition Protocol (Protocole d'acquisition) pour accéder au dossier
cytoDiffCXP (ou le nom spécifié lors de la création du dossier).
22 Ouvrez le fichier AS cytoDiffCXP settings.pro pour accéder aux paramètres de protocole
cytoDiffCXP.pro.
2-22
A99719AD
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
23 Sélectionnez Finish (Terminer) pour achever la création du panel.
24 Réduisez la fenêtre du logiciel CXP Cytometer et affichez la fenêtre Allow cytoDiffCXP panel
report.exe, sélectionnée précédemment au début de cette procédure.
25 Sélectionnez OK pour créer et achever le panel du logiciel CXP.
A99719AD
2-23
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
26 Sélectionnez OK lorsque le message New panel can now be used (Le nouveau panel peut
désormais être utilisé) s'affiche.
Format du fichier modèle de panel
Passez à la configuration du modèle de panel pour obtenir un rapport patient, maintenant que le
fichier modèle portant le même nom que celui attribué au panel a été créé avec l'extension .cpf
(clinical panel file, fichier de panel clinique). Afin de configurer le rapport patient, il est nécessaire
d'importer le fichier cytoDiffCXP Assay.cpf dans le fichier .cpf file.
Les étapes suivantes complèteront la configuration du panel CytoDiff CXP en important un rapport
de panel pré-défini. Le nom de panel (Mon nom de panel) utilisé dans cet exemple n'est utilisé qu'à
titre d'illustration.
1
2
2-24
Agrandissez la barre d'outils Report Generator (Générateur de rapport).
l'icône Modèle de panel
.
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Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
3
4
Sélectionnez File (Fichier) > Open (Ouvrir) dans la fenêtre Patient Template (Modèle de
patient).
Ouvrez le fichier .cpf. Celui-ci porte le même nom que le panel créé lors de l'étape 7, dans la
rubrique Créer un nouveau panel.
REMARQUE S'il est impossible de localiser le fichier .cpf portant le même nom que le panel, vérifiez
que le champ Export the results of this panel to the Report Generator (Exporter les résultats de
ce panel vers le générateur de rapport) a bien été coché lors de l'étape 9, dans la rubrique Créer un
nouveau panel.
A99719AD
2-25
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
5
6
Sélectionnez File (Fichier) > Import (Importer) dans la nouvelle fenêtre Patient Template
(Modèle de patient).
Saisissez les données suivantes dans les champs Panel Path (Chemin du panel) et Panel Name
(Nom du panel) de la fenêtre Template Import (Importation du modèle) :
Panel Path (Chemin du panel) : C:\CXP\Users\admin\Panel\cytoDiffCXP
Panel Name (Nom du panel) : cytoDiffCXP Assay
Cytometer Serial Number (Numéro de série du cytomètre)
REMARQUE Sélectionnez CTRL + W pour afficher le numéro de série du cytomètre dans l'onglet
User Info (Informations de l'utilisateur) des préférences de zone de travail.
2-26
A99719AD
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
7
8
Sélectionnez OK.
Cochez certains ou tous les champs suivants dans la fenêtre Patient Template (Modèle de
patient) :
Auto Print Report (Impression automatique du rapport) pour imprimer le rapport après
l'acquisition
Auto Save PDF (Enregistrement automatique au format PDF) pour enregistrer un fichier
.pdf de ce rapport
Auto Save XLS (Enregistrement automatique au format XLS) pour enregistrer les résultats
dans une feuille de calcul MS Excel.
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2-27
2
Installation du logiciel/protocoles
Création de rapport de panel
9
Sélectionnez File (Fichier) > Save (Enregistrer) dans la fenêtre Patient Template (Modèle de patient).
10 Sélectionnez OK dans la fenêtre du message Template saved succesfully (Enregistrement du
modèle réussi).
11 Le panel est prêt à être utilisé.
2-28
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CHAPITRE 3
Analyse des échantillons
Présentation
Ce chapitre contient les sections suivantes :
• Procédure de coloration et contrôle de la qualité
• Procédure d’analyse des échantillons
Procédure de coloration et contrôle de la qualité
Reportez-vous au mode d'emploi du réactif CytoDiff (Réf. A84341) pour tout complément
d'information sur les procédures de prélèvement, de contrôle de la qualité et de coloration.
Procédure d’analyse des échantillons
L'analyse d'un échantillon sanguin par le logiciel CytoDiff CXP nécessite le chargement du protocole
cytoDiffCXP.pro sur le logiciel CXP hôte pour une acquisition en temps réel ou après analyse. Pour
savoir comment charger un protocole d'analyse sur le CXP, consultez le manuel Instructions
d'utilisation du Cytomics FC 500 avec le logiciel CXP (Réf. 624923).
Le protocole de données cytoDiffCXP.pro
Le protocole de données cytoDiffCXP.pro contient les histogrammes, régions, légende, pages de flux
et fenêtres nécessaires pour générer et afficher les paramètres hématologiques décrits dans le
Tableau 1.1, Paramètres hématologiques 10 IVD fournis par le système CytoDiff. Reportez-vous au
Tableau 1.2, Applications d'auto-configuration et à la Figure 3.1, Protocole cytoDiffCXP.pro par
défaut pour afficher un échantillon du protocole par défaut cytoDiffCXP.pro sur le cytomètre FC 500,
avant l'acquisition des données ou après l'analyse.
A99719AD
3-1
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
AVERTISSEMENT
AVERTISSEMENT - Le logiciel CytoDiff CXP produira par défaut des régions en
forme de triangle, comme indiqué dans le Tableau A.1, Messages d'erreur CytoDiff
affichés dans la boîte de dialogue Résultats de l’analyse, si l'option Baseline
Offset (Déviation ligne de base) est activée dans l'onglet Plot Display (Affichage
de graphe), sous le menu File (Fichier) > Workspace Preferences (Préférences de
zone de travail).
Figure 3.1 Protocole cytoDiffCXP.pro par défaut
3-2
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Une fois un spécimen analysé, les histogrammes sont peuplés et les régions séparant les populations
sont automatiquement ajustées. Reportez-vous à la Figure 3.2, Protocole cytoDiffCXP.pro après
exécution du logiciel CytoDiff CXP pour un échantillon de sang total normal coloré avec le panel
CytoDiff.
Figure 3.2 Protocole cytoDiffCXP.pro après exécution du logiciel CytoDiff CXP
Les pages de flux suivantes font partie du protocole cytoDiffCXP.pro. Cet exemple s'applique à un
échantillon de sang total normal coloré avec le panel CytoDiff.
A99719AD
3-3
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.3 Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page 1)
3-4
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.4 Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page 2)
A99719AD
3-5
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.5 Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page 3)
3-6
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.6 Pages de flux définies dans le protocole cytoDiffCXP.pro (page 4)
Le logiciel CytoDiff CXP fournit une légende qui affiche le nom des paramètres hématologiques
générés par l'analyse. Voir la Figure 3.2 à la Figure 3.6 et les informations détaillées illustrées dans
la Figure 3.7. Cet exemple s'applique à un échantillon de sang total normal coloré avec le panel
CytoDiff.
A99719AD
3-7
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.7 Légende du protocole cytoDiffCXP.pro
Tableau B.1, Fenêtres CytoDiff CXP pour le protocole cytoDiffCXP.pro décrit les noms utilisés par la
légende pour marquer les paramètres, comme indiqué dans le Tableau 1.1, Paramètres
hématologiques 10 IVD fournis par le système CytoDiff. La légende n'inclut pas le paramètre
hématologique du total de blastes (c-à-d. : Xb + Xt + Xm + Xn); cependant, celui-ci peut être accédé
par l'intermédiaire du rapport de panel du logiciel CytoDiff CXP.
Tableau 3.1 Paramètres CytoDiff et légende correspondante
3-8
Paramètre CytoDiff (% de GB)
Légende
Lymphocytes B
Lymph. B
Total des lymphocytes T/NK
Lymph. T&NK
Total des lymphocytes
Total des monocytes
Neutrophiles matures
Neutro. matures
Éosinophiles
Total des éosinophiles
Basophiles
Total des basophiles
Granulocytes immatures
Gran. imm.
Lymphocytes T/NK CD 16 positif
T+
Lymphocytes T/NK CD 16 négatif
T-
Monocytes CD16 positif
M+
Monocytes CD16 négatif
M-
Xb
Xb
Xt
Xt
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Tableau 3.1 Paramètres CytoDiff et légende correspondante (Suite)
Paramètre CytoDiff (% de GB)
Légende
Xm
Xm
Xn
Xn
Comme indiqué dans la Figure 3.7, en plus du Tableau 3.1, Paramètres CytoDiff et légende
correspondante, le logiciel CytoDiff CXP présente les paramètres de laboratoire suivants, comme
illustré par le Tableau 3.2.
Tableau 3.2 CytoDiff pour un usage avec les paramètres de laboratoire uniquement.
Paramètres de laboratoire
(% des GB)
Description
Légende
Lymphocytes T/NK CD16 positif
Pourcentage de lymphocytes T/NK CD16
positif, expression positive
T+
Lymphocytes T/NK CD16 négatif
Pourcentage de lymphocytes T/NK CD16
négatif, expression négative
T-
Monocytes CD16 positif
Pourcentage de monocytes CD16 positif,
expression positive
M+
Monocytes CD16 négatif
Pourcentage de monocytes CD16 négatif,
expression négative
M-
Xb
Pourcentage de lymphocytes B immatures
ou très précoces
Xb
Xt
Pourcentage de lymphocytes T immatures
ou très précoces
Xt
Xm
Pourcentage de monocytes très immatures Xm
ou très précoces
Xn
Pourcentage de Lymphocytes non-T ou
non-B très immatures ou très précoces
Xn
Réglage de région par le logiciel CytoDiff CXP
La procédure d'analyse du logiciel CytoDiff se compose de trois étapes principales.
1. Détection de l'interférence de cellules autres que des GB
2. Procédure de gating général
3. Mesures pour une analyse d'échantillon améliorée
Figure 3.8, Logique d'analyse des échantillons décrit les principaux composants. Reportez-vous à
l'ANNEXE B, et au mode d'emploi du réactif (Réf. A84341) pour la création manuelle de protocoles.
A99719AD
3-9
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.8 Logique d'analyse des échantillons
Détection de l'interférence de cellules autres que des GB
La première étape de la procédure d'analyse des échantillons est destinée à retirer de l'analyse les
événements ne correspondant pas à des leucocytes. Ces interférences ont un effet déséquilibrant
sur les populations de globules blancs et peuvent altérer la formule si elles ne sont pas supprimées.
Voir la Figure 3.9, Interférences ne correspondant pas à des GB sur l'histogramme CD45/CD36 (zone
à l'intérieur de la ligne pointillée).
3-10
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.9 Interférences ne correspondant pas à des GB sur l'histogramme CD45/CD36
La détection des interférences ne correspondant pas à des GB est effectuée en configurant deux
régions identifiées comme Ra et Rb autour des événements d'interférence sur les histogrammes
CD19/CD2-CRTH2 et CD45/CD2-CRTH2, respectivement, comme indiqué dans la
Figure 3.10, Régions Ra et Rb pour la détection des interférences ne correspondant pas à des GB.
Figure 3.10 Régions Ra et Rb pour la détection des interférences ne correspondant pas à des GB
Le retrait de ces interférences de l'analyse est réalisé en sélectionnant les événements inclus à la fois
dans Ra et Rb. Les régions Ra et Rb sont ajoutées à des fenêtres sélectionnées afin de filtrer les
événements d'interférence. Un nombre d'événements faible à l'emplacement attendu pour les
événements d'interférence ne correspondant pas à des GB ou une grande incertitude dans le calcul
de Ra ou Rb désactivera le mécanisme de détection et des régions en forme de triangle seront
générées dans l'angle supérieur gauche des histogrammes correspondants, comme indiqué dans la
A99719AD
3-11
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.11, Régions Ra et Rb en forme de triangle par défaut pour une faible interférence ne
correspondant pas à des GB.
Figure 3.11 Régions Ra et Rb en forme de triangle par défaut pour une faible interférence ne correspondant
pas à des GB
Seules les populations de neutrophiles, monocytes, éosinophiles et granulocytes immatures
peuvent être affectées par Ra et Rb.
Définition d'une région automatisée
Le logiciel CytoDiff CXP ajuste automatiquement chaque région pour qu'elle s'adapte aux
caractéristiques de chaque échantillon. Ce processus implique une série d'étapes où chaque
histogramme est analysé afin de déterminer la région de séparation la plus appropriée. Le processus
global de flux, les histogrammes 2D et les régions impliquées à chaque étape de classification sont
indiqués dans la Figure 3.12.
3-12
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Voir la Figure 3.12 pour les classificateurs sur les histogrammes 2D.
Figure 3.12 Classificateurs CytoDiff sur les histogrammes 2D
Chaque classificateur de la Figure 3.12 connait à l'avance l'emplacement attendu de la population
ciblée (c-à-d. lymphocytes B CD19+). Avec une analyse par grappes automatisée basée sur des
techniques de traitement d'image numérique, ces informations permettent au logiciel d'ajuster
dynamiquement les régions nécessaires pour isoler les populations d'intérêt.
Si une erreur d'application ou d'utilisateur est détectée par le logiciel CytoDiff CXP, des régions par
défaut en forme de triangle sont placées sur les histogrammes CD19/SS et CD45/CD36 pour produire
des résultats non plausibles. Dans ce cas, des messages d'erreur s'afficheront également dans la
fenêtre des résultats d'analyse (Voir Messages d'erreur CytoDiff CXP).
Les histogrammes restant dans cette section ont été analysés à partir de sang total normal coloré
avec le panel CytoDiff. Le premier histogramme analysé par le logiciel CytoDiff CXP correspond à la
combinaison de paramètres CD19–SS (Figure 3.13). Les cellules à l'intérieur de la région identifiée
par le marqueur CD19+ correspondent généralement aux catégories de lymphocytes B ou de
lymphocytes B immatures. Une distinction supplémentaire entre ces deux catégories est établie
plus tard au cours du processus.
A99719AD
3-13
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.13 Classification des lymphocytes B ou des lymphocytes B immatures à l'aide de
l'histogramme CD19/SS
Les cellules en dehors de la région CD19+ sont accumulées dans un deuxième histogramme
contenant les paramètres CD45 et CD36. L'histogramme 2D CD45/CD36 contient la région CD45+ qui
a pour but de séparer les GB restants des débris de GR et des plaquettes (Figure 3.14).
Figure 3.14 Classification des GB par séparation des débris de GR et des plaquettes à l'aide de
l'histogramme CD45/CD36
Les cellules à l'intérieur de la région CD45+ sont accumulées dans un histogramme défini par la
combinaison de paramètres CD16 et SS. Les cellules en dehors de la région CD45+ sont rejetées en
vue d'une analyse supplémentaire. L'histogramme CD16–SS illustré dans la Figure 3.15 montre
l'isolation de neutrophiles matures. A cette fin, une région dynamique marquée CD16+ est fournie
par le logiciel CytoDiff CXP.
3-14
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.15 Classification des neutrophiles immatures à l'aide de l'histogramme CD16/SS
Les cellules en dehors des régions CD16+ sont accumulées dans un histogramme utilisant la
combinaison de paramètres CD36/CD2+CRTH2. Dans l'histogramme CD36/CD2+CRTH2 de la
Figure 3.16, la région CD36+ catégorise les monocytes et les monocytes immatures. La logique de
gating permet par la suite d'établir une distinction supplémentaire entre ces deux catégories.
Figure 3.16 Classification des monocytes et/ou des monocytes immatures à l'aide de l'histogramme CD36/
CD2+CRTH2
Les cellules en dehors de la région CD36+ sont accumulées dans un histogramme combinant les
paramètres CD16 et SS. L'histogramme CD16 et SS est employé pour distinguer les éosinophiles(EO)
et les granulocytes immatures(IG) des GB restants. Pour cela, une région marquée EO & IG est créée
tel qu'illustré par la Figure 3.17. Une distinction supplémentaire entre ces deux catégories est
établie plus tard au cours du processus.
A99719AD
3-15
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.17 Classification des éosinophiles et/ou des granulocytes immatures à l'aide de
l'histogramme CD16/SS
Les cellules en dehors de la région EO et IG sont accumulées dans un histogramme présentant une
combinaison de paramètres CD45–SS et sont de plus catégorisées par la région marquée LY.T&NK.
Les cellules à l'intérieur de la région LY.T et NK appartiennent à la sous-population de lymphocytes
T et de cellules NK (Figure 3.18). Les cellules en dehors de la région LY.T et NK sont accumulées dans
un nouvel histogramme utilisant la combinaison de paramètres CD45 et CD2+CRTH2.
Figure 3.18 Classification des lymphocytes T et/ou des cellules NK à l'aide de l'histogramme CD45/SS
L'histogramme CD45/CD2+CRTH2 contient les GB restants qui sont des basophiles et des cellules
immatures. Les cellules présentant une expression négative pour CD2+CRTH2 sont classifiées
comme appartenant aux cellules lymphatiques non-B et non-T immatures (Figure 3.19). Cette
catégorie est définie par la région marquée Xn dans l'histogramme CD45/CD2+CRTH2.
3-16
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.19 Classification des lymphocytes immatures non-T et non-B à l'aide de l'histogramme CD45/
CD2+CRTH2.
Les cellules en dehors de la région Xn sont accumulées dans un histogramme présentant une
combinaison des paramètres SS et FS pour distinguer les basophiles des lymphocytes T immatures.
Les cellules à l'intérieur de cette région sont classifiées comme en dehors de la région BA et
classifiées comme lymphocytes T immatures. (Figure 3.20).
Figure 3.20 Classification des basophiles et des lymphocytes T immatures à l'aide de l'histogramme SS/FS
À ce stade, les cellules marquées CD19+ (Figure 3.13) sont accumulées dans un histogramme
combinant les paramètres CD45–SS. Ceci permet de distinguer les lymphocytes B matures des
lymphocytes B immatures (Figure 3.21). La région des lymphocytes B matures est marquée {LY.B}
alors que la région des lymphocytes B immatures ou très précoces est marquée Xb.
A99719AD
3-17
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.21 Classification des lymphocytes T et lymphocytes B immatures ou très précoces à l'aide de
l'histogramme CD45/SS
Les évènements à l'intérieur de la région EO et IG illustrés par la Figure 3.17 sont accumulés dans un
histogramme CD45–CD2+CRTH2 pour produire une catégorisation finale des EO et des IG
(Figure 3.22).
Figure 3.22 Classification des éosinophiles et des monocytes immatures à l'aide de l'histogramme CD45/
CD2+CRTH2.
3-18
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Les évènements catégorisés de CD36+ (Figure 3.16) sont accumulés dans un histogramme CD45–SS
pour séparer les monocytes immatures avec expression CD36 des monocytes. La région
correspondant aux monocytes très précoces ou très immatures est marquée Xm alors que la région
des monocytes est marquée {MO} (Figure 3.23).
Figure 3.23 Classification des monocytes très précoces ou très immatures à l'aide de l'histogramme CD45/SS
Les évènements marqués monocytes dans la Figure 3.23 sont ensuite répartis entre monocytes CD16
positif et monocytes CD16 négatif dans la Figure 3.24. Pour cela, les monocytes sont accumulés dans
un histogramme CD16–SS. Les régions définissant les monocytes CD16 négatif et positif sont
respectivement marquées {M-} et M+ (Figure 3.24).
A99719AD
3-19
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Figure 3.24 Classification de monocytes CD16- ou CD16+ à l'aide de l'histogramme CD16/SS
Enfin, les évènements identifiés comme appartenant à la région LY.T et NK illustrés par la
Figure 3.18 sont accumulés dans un histogramme CD16–SS pour distinguer les lymphocytes T et NK
CD16 négatif des lymphocytes T et NK CD16 positif tel qu'illustré par la Figure 3.25. Les régions
correspondant aux lymphocytes T et NK CD16 négatif et aux lymphocytes T et NK CD16 positif sont
respectivement marquées {T-} et T+.
Figure 3.25 Classification des lymphocytes T et des cellules NK CD16- ou CD16+ à l'aide de l'histogramme
CD16/SS
3-20
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Mesures supplémentaires pour prendre en charge l'analyse
Le logiciel CytoDiff CXP fournit des mesures supplémentaires pouvant être utilisées pour prendre
en charge le processus d'analyse des échantillons. Dans ce contexte, on entend par mesure une
valeur numérique allant de 0 à 100, où les petites valeurs sont associées à l'absence de la
caractéristique décrite par la mesure. À l'inverse, une valeur numérique proche de la limite
supérieure est associée avec une corrélation plus forte à la présence d'une caractéristique.
Les mesures proposées sont divisées en deux catégories :
• Reposant sur les histogrammes - mesures calculées en se basant sur des caractéristiques
extraites de l'histogramme en deux dimensions par les régions CytoDiff.
• Reposant sur les populations - mesures créées pour des populations CytoDiff choisies.
Les mesures suivantes reposant sur les histogrammes sont calculées par le logiciel CytoDiff :
intervalle de confiance (IC) des régions, indice de normalité et diverses. La mesure de l'intervalle de
confiance d'une région évalue la qualité de séparation obtenue par la forme et l'emplacement de la
région associée. Reportez-vous au Tableau 3.3, Mesure de l'intervalle de confiance des régions.
Tableau 3.3 Mesure de l'intervalle de confiance des régions
Région CytoDiff CXP
Mesure de l'intervalle de confiance des régions
CD19+
IC région CD19+
CD45+
IC région CD45+
CD16+
IC région CD16+
CD36+
IC région CD36+
Eo & IG
IC région EO&IG
LY.T&NK
IC région LY.T&NK
Xn
IC région Xn
Ba
IC région BA
Xb
IC région Ly.B
Eo
IC région EO
Xm
IC région Xm
La mesure de l'indice de normalité quantifie la similarité des populations sélectionnées avec une
distribution connue (c-a-d. : Gaussian). Ces mesures peuvent être particulièrement utiles si une
population segmentée est bien définie ou est un sous-ensemble d'une autre population, un
processus aléatoire (tel que le bruit) ou la combinaison de tous ces facteurs Tableau 3.4 énumère les
indices de normalité fournis par le logiciel CytoDiff CXP.
Tableau 3.4 Indice de normalité pour des populations choisies
A99719AD
Population
Indice de normalité
IG
Normalité IG
Xb
Normalité Xb
Xt
Normalité Xt
3-21
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Tableau 3.4 Indice de normalité pour des populations choisies (Suite)
Population
Indice de normalité
Xm
Normalité Xm
Xn
Normalité Xn
Les mesures diverses évaluent des caractéristiques spécifiques observées dans le système CytoDiff.
Ces mesures peuvent être utilisées pour indiquer le besoin d'une analyse d'échantillon. Tableau 3.5
décrit les mesures diverses.
Tableau 3.5 Mesures diverses
Mesure
Description
Pourcentage d'agrégation NE
Pourcentage d'agrégation estimé des neutrophiles
Pourcentage de mono. séparés sur
CD45-SS
Pourcentage de la population des monocytes séparés sur
l'histogramme CD45/SS
Faible pourcentage des gran. CD 16
Pourcentage des [(IG + EO)/total NE]
Pourcentage d'interférence des GB
Pourcentage de l'interférence détectée ne correspondant
pas à des GB
Indice de correspondance du
CD45-SS normal
Indice de correspondance du modèle entre un échantillon
reçu et un modèle normal prédéfini sur la vue CD45/SS.
Les mesures reposant sur les populations apporte un niveau d'information supplémentaire
concernant une population en particulier. Les mesures reposant sur les histogrammes et leur
signification statistique sont associées aux informations concernant l'ordre de gating et pour
produire des mesures reposant sur les populations. L'ordre de gating est incorporé en prenant
compte les mesures de séparabilité des régions impliquées dans l'ordre de gating de la population.
D'autres mesures (comme les indices de normalité et les mesures diverses) concernant les
populations peuvent également faire partie d'une mesure reposant sur les populations. Reportezvous au Tableau 3.5.
Des attributs statistiques comme le nombre d'événements et les pourcentages sont utilisés pour
estimer les indices de normalité et mesures diverses de sorte que les mesures dérivées des comptes
ou pourcentages d'événements très faible ont une incidence moindre sur les mesures reposant sur
les populations. Toutes les mesures indépendantes sont statistiquement combinées (regroupées) en
une seule valeur numérique.
Tableau 3.6 énumère chacun des composants bruts des mesures reposant sur les populations
disponibles dans le logiciel CytoDiff.
Tableau 3.6 Mesures de base des populations (Intervalle de confiance, IC)
3-22
Mesure
Composants de la mesure brute
IC des lymphocytes B
• IC région CD19+
IC des lymphocytes T
• IC région LY.T&NK
IC des monocytes
• IC région CD36+
• IC région Ly.B
• Pourcentage de mono. séparés sur
CD45-SS
A99719AD
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
Tableau 3.6 Mesures de base des populations (Intervalle de confiance, IC) (Suite)
Mesure
Composants de la mesure brute
IC des neutrophiles
• IC région CD16+
• Pourcentage d'agrégation NE
• Faible pourcentage des Gran. CD 16
IC des éosinophiles
• IC région CD16+
• IC région EO&IG
• IC région EO
• Faible pourcentage des Gran. CD16
IC des basophiles
• IC région BA
• IC région LY.T&NK
• IC région Xn
• Pourcentage d'interférence des GB
IC des gran.
immatures
• IC région CD16+
• IC région EO&IG
• IC région EO
IC Xb
• IC région CD19+
• IC région Ly.B
• Indice de normalité Xb
IC Xt
• IC région BA
• IC région Xn
• IC région LY.T&NK
• Faible pourcentage des Gran. CD16
• Mono. séparés sur CD45 • Indice de normalité IG
• Indice de normalité Xt
• Pourcentage d'interférence des GB
IC Xm
• IC région Xm
• Indice de normalité Xm
IC Xn
• IC région Xn
• IC région IG&EO
• IC région LY.T&NK
• Indice de normalité Xn
À des fins de dépistage, un intervalle de confiance global est fournit et défini par l'opérateur
d'agrégation minimale.
IC global minimum = Minimum (IC Région CD45+,
Intervalle de confiance des lymphocytes B,
Intervalle de confiance des lymphocytes T,
Intervalle de confiance des monocytes,
Intervalle de confiance des neutrophiles,
Intervalle de confiance des éosinophiles,
Intervalle de confiance des basophiles,
Intervalle de confiance des gran. immatures)
A99719AD
3-23
3
Analyse des échantillons
Procédure d’analyse des échantillons
3-24
A99719AD
CHAPITRE 4
Caractéristiques de performance
Présentation
Les caractéristiques des performances présentées ci-dessous ont été collectées sur un système de
cytométrie en flux FC 500 avec logiciel de cytométrie CXP utilisant le logiciel algorithme CytoDiff
sans modification des résultats générés par l'algorithme.
Valeurs attendues
Des échantillons de sang total ont été prélevés sur une population apparemment saine d’hommes et
de femmes présentant des résultats hématologiques normaux (n=121). Les valeurs normales
représentatives sont présentées dans le Tableau 4.1. Chaque laboratoire devrait définir ses propres
intervalles de référence
Tableau 4.1 Sang total normal (% GB)
A99719AD
Population
n
Mean
Limite inférieure de
l'intervalle de
confiance à 95%
Limite supérieure de
l'intervalle de
confiance à 95%
Lymphocyte B
123
4,14
1,65
6,99
Total lymphocyte T/NK
123
27,37
16,94
36,99
Total lymphocyte
123
31,52
19,51
44,06
Total monocyte
123
7,24
4,32
10,91
Neutrophile mature
123
56,32
43,97
71,19
Total neutrophile
123
56,46
44,30
71,24
Éosinophile (Eo)
123
3,62
1,01
8,41
Basophile
123
0,79
0,23
1,61
Granulocyte immature
123
0,14
0,02
0,46
Total blaste
123
0,38
0,09
0,82
4-1
Caractéristiques de performance
Linéarité
Linéarité
La détermination de linéarité a été réalisée grâce à des dilutions en série du sang total. La régression
linéaire et R² sont indiquées dans le Tableau 4.2.
Tableau 4.2 Régression linéaire
Spécificité
Gamme recueillie
Ligne de régression Linéarité (R²)
CD36+
1,41-2 x 76,10-3
y = 0,977x - 154
0,995
CD2+CRTH2+
2,52-4 x 69,10-3
y = 1,009x + 19.6
0,987
CD19+
0,38-2,95 x 10-3
y = 0,968x -66
0,992
CD16+
28,60-3 x 49,10-3
y = 0,957x -5542
0,990
CD45+
5,7-2 x 78,10-3
y = 0,984x -685,7
0,997
Exactitude de la méthode
Le degré de concordance entre le panel CytoDiff et les méthodes et réactifs de comparaison a été
étudié à l'aide de 157 dans un sang normal et anormal. Les données fournies au tableau ci-dessous
viennent à l'appui de l'argument que les réactifs sont équivalents dans leur performance
d'énumération des lymphocytes B, du total des lymphocytes T/NK, du total des lymphocytes, du
total des monocytes, des neutrophiles matures, du total des neutrophiles, des eosinophiles, des
basophiles, des granulocytes immatures et du total des blastes.
Tableau 4.3 Equivalence réactif
Population
n
min
max
Moyenne ± 1DS
Panel CytoDiff
157
0,00
95,4
10,4 ± 20,0
tetraCHROME CD45/CD56/CD19/CD3
157
0,00
94,8
9,5 ± 19,0
Panel CytoDiff
157
0,30
71,18
18,1 ± 13,2
Lymphocytes T/NK CD2+
157
0,20
71,5
16,4 ± 12,8
Panel CytoDiff
157
1,80
97,70
28,5 ± 22,5
Différentielle manuelle
157
1,0
97,3
27,7 ± 22,3
Panel CytoDiff
157
0,0
93,7
10,4 ± 11,4
Différentielle manuelle
157
0,0
92,0
9,8 ± 10,7
Lymphocyte B (% GB)
Total lymphocyte T/NK (% GB)
Total lymphocyte (% GB)
Total monocyte (% GB)
4-2
A99719AD
Caractéristiques de performance
Exactitude de la méthode
Tableau 4.3 Equivalence réactif (Suite)
Population
n
min
max
Moyenne ± 1DS
Panel CytoDiff
157
0,1
89,6
47,5 ± 22,9
Différentielle manuelle
157
0,0
91,3
51,5 ± 23,2
Panel CytoDiff
157
0,2
91,7
52,2 ± 24,0
Différentielle manuelle
157
0,0
95,8
54,7 ± 25,0
Panel CytoDiff
157
0,0
39,4
2,1 ± 3,9
Différentielle manuelle
157
0,0
37,3
1,8 ± 3,6
Panel CytoDiff
157
0,0
4,1
0,6 ± 0,7
Différentielle manuelle
157
0,0
2,8
0,3 ± 0,5
Panel CytoDiff
157
0,0
44,3
4,7 ± 8,3
Différentielle manuelle
157
0,0
41,8
3,3 ± 6,6
Panel CytoDiff
157
0,1
94,5
6,1 ± 15,9
Différentielle manuelle
157
0,0
95,5
5,5 ± 16,4
Neutrophile mature (% GB)
Total neutrophile (% GB)
Eosinophile (% GB)
Basophile (% GB)
Granulocyte immature (% GB)
Total blaste (% GB)
A99719AD
4-3
4
Caractéristiques de performance
Précision
Précision
Les performances ci-dessous s'appliquent à une population d'au moins 0,3 %.
Tableau 4.4 Précision
4-4
Population au %
CV (%)
Lymphocytes B à 2,6
5,2
Total des lymphocytes T/NK à 11,5
2,6
Total des lymphocyte B à 11,8
2,5
Total des monocytes à 8,4
4,0
Neutrophiles Matures à 51,1
2,1
Total des neutrophiles à 57,0
1,3
Total des éosinophiles à 1,3
18,4
Total des basophiles à 0,7
25,3
Granulocytes immatures à 5,9
12,2
Total des blastes à 0,8
18,3
A99719AD
CHAPITRE 5
Limitations du système/précautions
Limitations du système
• L'utilisation du réactif CytoDiff sur le cytomètre en flux FC 500 nécessite le kit de filtre laser
unique ou le bloc de filtre laser unique.
• Des résultats exacts et reproductibles seront obtenus tant que les procédures employées sont
conformes au Mode d'emploi du panel CytoDiff et s'alignent sur de bonnes pratiques de laboratoire.
• Tous les histogrammes doivent être passés en revue avant la production d’un rapport sur les
résultats pour s’assurer que l’analyse a été réalisée correctement.
• Lorsque les résultats générés par l'algorithme sont modifiés par intervention de l'utilisateur (réglage
manuel des méthodes de gating), il appartient à l'utilisateur de régler correctement les régions.
• Dans certains états pathologiques (insuffisance rénale grave ou certaines hémoglobinopathies,
par exemple) la lyse de GR peut être lente, incomplète, voire impossible. Tous les globules
rouges peuvent ne pas être lysés dans les conditions suivantes : présence de globules rouges
nucléés, concentration protéinique anormale ou certaines hémoglobinopathies. Des
pourcentages erronément inférieurs peuvent être obtenus à cause de globules rouges non lysés
qui seront comptés comme leucocytes.
• Des états de santé anormaux ne sont pas toujours représentés par des pourcentages anormaux
de certaines populations de leucocytes. Un individu dans un état de santé anormal peut
présenter les mêmes pourcentages de leucocytes qu’une personne en bonne santé. Utilisez les
résultats du test conjointement avec des données de diagnostic clinique et autre.
• Des cellules avec un marquage très faible ou négatif pour le CD45 peuvent affecter le
pourcentage de blastes.
• Si des neutrophiles avec un marquage faible ou négatif pour le CD 16 sont présents sous
certaines conditions, confirmez les résultats à l'aide d'une autre méthode.
• Le logiciel d'algorithme CytoDiff peut produire des résultats erronés si le cytomètre n'a pas été
configuré conformément aux instructions contenues dans ce Guide du système, dans les
manuels accompagnant l'instrument et dans le Mode d'emploi du réactif.
• Des résultats erronés peuvent être obtenus si un nombre insuffisant de globules blancs est
utilisé pour l'analyse.
Précautions
Les utilisateurs devront tenir compte de toutes erreurs de système notées au cours de l'analyse
telles que décrites dans le guide du système et le mode d'emploi du réactif.
A99719AD
5-1
Limitations du système/précautions
Précautions
5-2
A99719AD
ANNEXE A
Dépannage
Présentation
Cette annexe comprend les messages d'erreur CytoDiff CXP.
Messages d'erreur CytoDiff CXP
Si une erreur d'analyse survient, les régions CD19+ et CD45+ du protocole cytoDiffCXP.pro sont
configurées de façon à présenter des formes triangulaires et sont positionnées dans un endroit où
vont éventuellement tomber un très petit nombre d'évènements. Étant donné que tous les résultats
rapportés dépendent des régions CD19+ et CD45+, les résultats pouvant être rapportés pour ces cas
devraient être de zéro ou proches de zéro. Le tableau A.1 dresse la liste des conditions ou causes
connues qui vont déclencher la fonctionnalité de prise en charge d'erreur du logiciel CytoDiff CXP.
Il indique également la réponse du logiciel et l'erreur.
Tableau A.1 Messages d'erreur CytoDiff affichés dans la boîte de dialogue Résultats de l’analyse
Message d’erreur
affiché
Cause
Réponse logicielle
Solution possible
Invalid Protocol
(Protocole incorrect)
Mode liste incorrect à
repasser dans le
protocole.
Le message d'erreur
apparaît dans l'en-tête de
FlowPAGE. CD19+ et
CD45+ sont des
histogrammes qui
s'affichent sous forme
triangulaire. Les résultats
de panel CytoDiff seront
définis sur « ERR ».
Représentez les
données mode liste
dans le protocole
approprié.
Le message d'erreur
apparaît dans l'en-tête de
FlowPAGE. CD19+ et
CD45+ sont des
histogrammes qui
s'affichent sous forme
triangulaire. Les résultats
de panel CytoDiff seront
définis sur « ERR ».
Représentez les
données mode liste
après avoir désactivé
l'option Baseline
Offset (Déviation
ligne de base).
Régions manquantes
Paramètres ne
correspondent pas
Baseline Offset Error
(Erreur déviation ligne
de base)
A99719AD
L'utilisateur a sélectionné
l'option Baseline Offset
(Déviation ligne de base)
dans l'onglet Plot Display
(Affichage de graphe) des
préférences de zone de
travail dans le logiciel CXP.
A-1
Dépannage
Messages d'erreur CytoDiff CXP
Tableau A.1 Messages d'erreur CytoDiff affichés dans la boîte de dialogue Résultats de l’analyse (Suite)
Message d’erreur
affiché
Cause
Réponse logicielle
Data Corruption Error
(Erreur de corruption
de données)
Séquence d'horodatage
incorrecte détectée sur
fichier LMD.
Repassez les
Le message d'erreur
apparaît dans l'en-tête de données.
FlowPAGE. CD19+ et
CD45+ sont des
histogrammes qui
s'affichent sous forme
triangulaire. Les résultats
de panel CytoDiff seront
définis sur « ERR ».
Application Error
(Erreur d'application)
L'exécution de
l'algorithme est
interrompue par une
exception de l'application.
Analysez l'échantillon
Le message d'erreur
apparaît dans l'en-tête de à l'aide d'une autre
méthode.
FlowPAGE. CD19+ et
CD45+ sont des
histogrammes qui
s'affichent sous forme
triangulaire. Les résultats
de panel CytoDiff seront
définis sur « ERR ».
FS Events at Zero
(Événements FS à zéro)
Le système métrique ne
peut pas être programmé
parce que les événements
de l'histogramme FS sont
sur le canal 0.
Le message d'erreur
apparaît dans l'en-tête de
FlowPAGE. CD19+ et
CD45+ sont des
histogrammes qui
s'affichent sous forme
triangulaire. Les résultats
de panel CytoDiff seront
définis sur « ERR ».
Too Few Events
Le système métrique ne
(Pas assez d'événements) peut pas être programmé
à cause d'un nombre
insuffisant d'événements
dans l'histogramme FS
Solution possible
Vérifiez le
déclenchement FS.
Repassez les
données.
Analysez l'échantillon
Le message d'erreur
apparaît dans l'en-tête de à l'aide d'une autre
méthode.
FlowPAGE. CD19+ et
CD45+ sont des
histogrammes qui
s'affichent sous forme
triangulaire. Les résultats
de panel CytoDiff seront
définis sur « ERR ».
L'en-tête de FlowPAGE n'affichera qu'un seul message dans le cas où plusieurs erreurs seraient
détectées. Figure A.1 présente une capture d'écran des régions CD19+ et CD45+ après qu'une erreur
de protocole incorrect ait été détectée. Figure A.2 présente un exemple d'en-tête de FlowPAGE
lorsqu'un échantillon est traité avec l'option Baseline Offset (Déviation ligne de base) activée. Enfin,
la Figure A.3 montre un résultat de panel CytoDiff quand une erreur est détectée.
A-2
A99719AD
Dépannage
Messages d'erreur CytoDiff CXP
Figure A.1 Erreur de protocole incorrect
Figure A.2 En-tête de page de flux indiquant le type d'erreur
A99719AD
A-3
A
Dépannage
Messages d'erreur CytoDiff CXP
Figure A.3 Résultats de panel CytoDiff après une détection d'erreur
A-4
A99719AD
ANNEXE B
Fenêtres pour le protocole cytoDiff CXP.pro
Présentation
Cette annexe comprend les fenêtres, régions et calculs des paramètres CytoDiff pour le panel et les
résultats exportés.
Nom et définition de la fenêtre
Tableau B.1 présente toutes les fenêtres définies au sein du protocole cytoDiffCXP.pro ainsi que la
définition correspondante en termes d'utilisateurs et de régions. Les statistiques de région CytoDiff,
comme par exemple le nombre d'événements, sont calculées quand chaque région est reliée à un
histogramme produit lors de l'application d'une des fenêtres aux données.
Tableau B.1 Fenêtres CytoDiff CXP pour le protocole cytoDiffCXP.pro
A99719AD
Nom de la fenêtre
Définition de la fenêtre
Baso.Total
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG) AND NOT (LY.T&NK) AND NOT (Xn) AND BA)
Eosino.Total
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND (Eo & IG) AND EO AND NOT (Ra AND Rb))
Imm. Gran
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND (Eo & IG) AND NOT (EO) AND NOT (Ra AND Rb))
Lymph.B
(CD 19+ AND NOT (Xb))
Lymph.T&NK
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG) AND LY.T&NK)
Lymph.Total
((NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT
(CD36+) AND NOT (Eo & IG) AND LY.T&NK) OR (CD19+ AND NOT
(Xb)))
M-
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND (CD36+) AND
NOT (Xm) AND NOT (M+) AND NOT (Ra AND Rb))
M+
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND (CD36+) AND
NOT (Xm) AND M+ AND NOT (Ra AND Rb))
Mono.Total
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND (CD36+) AND
NOT (Xm) AND NOT (Ra AND Rb))
Neutro.Mature
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND CD16+ AND NOT (Ra AND Rb))
B-1
Fenêtres pour le protocole cytoDiff CXP.pro
Présentation
Tableau B.1 Fenêtres CytoDiff CXP pour le protocole cytoDiffCXP.pro (Suite)
B-2
Nom de la fenêtre
Définition de la fenêtre
Neutro.Total
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND (CD16+ OR (NOT (CD16+) AND
NOT (CD36+) AND Eo & IG AND NOT (Eo))) AND NOT (Ra AND Rb))
Plt Interference
(Ra AND Rb)
Step 2_After B Cell
(NOT (CD19+) AND NOT (Eo & IG AND Ra AND Rb) AND NOT
(CD16+ AND Ra AND Rb) AND NOT (CD36+ AND Ra AND Rb))
Step 3_After NonWBC
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (Eo & IG AND Ra AND Rb)
AND NOT (CD16+ AND Ra AND Rb) AND NOT (CD36+ AND Ra
AND Rb))
Step 4_After Neutro
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+
AND Ra AND Rb) AND NOT (Eo & IG AND Ra AND Rb))
Step 5_After Mono
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG AND Ra AND Rb))
Step 6_After IG&Eo
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG))
Step 7_After Ly_T&NK
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG) AND NOT (LY.T&NK))
Step 8_After BlstBnT
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG) AND NOT (LY.T&NK) AND NOT (Xn))
Stop Count
(StopCount)
T-
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG) AND LY.T&NK AND NOT (T+))
T+
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG) AND LY.T&NK AND (T+))
Total B Cell
(CD19+)
Total CD36+
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND (CD36+) AND
NOT (Eo & IG AND Ra AND Rb))
Total Diff
(CD19+ OR (CD45+ AND NOT (Eo & IG AND Ra AND Rb) AND NOT
(CD16+ AND Ra AND Rb) AND NOT (CD36+ AND Ra AND Rb)))
Total IG & Eo
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND (Eo & IG ) AND Eo & IG AND NOT (Ra AND Rb))
Total Lymph.T&NK
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG ) AND LY.T&NK)
Xb
(CD19+ AND Xb)
Xm
(NOT (CD19+) AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND CD36+ AND
Xm AND NOT (Ra AND Rb))
Xn
(NOT (CD19+ AND CD45+ AND NOT (CD16+) AND NOT (CD36+)
AND NOT (Eo & IG ) AND NOT (LY.T&NK) AND Xn)
A99719AD
Fenêtres pour le protocole cytoDiff CXP.pro
Présentation
Tableau B.2 représente les régions CytoDiff du protocole cytoDiffCXP.pro, ainsi que les fenêtres et
histogrammes respectifs.
Tableau B.2 Région, histogramme et fenêtres respectives du protocole CytoDiff
Sur l'histogramme
A99719AD
Région
Axe X
Axe Y
Fenêtre correspondante
StopCount
CD45 PC7 (FL5 Log)
SS
Ungated
CD19+
CD19 ECD (FL3 Log)
SS
Ungated
CD45+
CD45 PC7 (FL5 Log)
CD36 FITC (FL1 Log)
Step2_After B Cell
CD16+
CD16 PC5 (FL4 Log)
SS
Step 3_After NonWBC
CD36+
CD36 FITC (FL1 Log)
CD2 + CRTH2 PE
(FL2 Log)
Step4_After Neutro
Eo & IG
CD16 PC5 (FL4 Log)
SS
Step5_After Mono
LY.T&NKl
CD45 PC7 (FL5 Log)
SS
Step6_After IG&Eo
Xn
CD45 PC7 (FL5 Log)
CD2 + CRTH2 PE
(FL2 Log)
Step7_After Ly_T&NK
BA
SS (Lin)
FS (Lin)
Step8_After BlstnBnT
{Xt}
SS (Lin)
FS (Lin)
Step8_After BlstnBnT
Xb
CD45 PC7 (FL5 Log)
SS
Total B Cell
{LY.B}
CD45 PC7 (FL5 Log)
SS
Total B Cell
EO
CD45 PC7 (FL5 Log)
CD2 + CRTH2 PE
(FL2 Log)
Total IG & Eo
{IG}
CD45 PC7 (FL5 Log)
CD2 + CRTH2 PE
(FL2 Log)
Total IG & Eo
Xm
CD45 PC7 (FL5 Log)
SS
Total CD36+
{MO}
CD45 PC7 (FL5 Log)
SS
Total CD36+
M+
CD16 PC5 (FL4 Log)
SS
Mono. Total
{M-}
CD16 PC5 (FL4 Log)
SS
Mono. Total
T+
CD16 PC5 (FL4 Log)
SS
Total Lymph.T&NK
{T-}
CD16 PC5 (FL4 Log)
SS
Total Lymph.T&NK
Ra
CD19 ECD (FL3 Log)
CD2 + CRTH2 PE
(FL2 Log)
Ungated
Rb
CD45 PC7 (FL5 Log)
CD2 + CRTH2 PE
(FL2 Log)
Ungated
WBC Report
SS
FS (Lin)
Total Diff
IG Report
SS
FS (Lin)
Imm Gran
M- Report
SS
FS (Lin)
M-
T- Report
SS
FS (Lin)
T-
Ly.B Report
SS
FS (Lin)
Lymph. B
B-3
B
Fenêtres pour le protocole cytoDiff CXP.pro
Présentation
Tableau B.2 Région, histogramme et fenêtres respectives du protocole CytoDiff (Suite)
Sur l'histogramme
Région
Axe X
Axe Y
Fenêtre correspondante
Lymph Total Report
SS
FS (Lin)
Lymph.Total
Xt Report
SS
FS (Lin)
Xt
Le calcul des pourcentages de population CytoDiff est effectué comme indiqué dans le Tableau B.3,
en utilisant les régions disponibles et les fenêtres respectives. Ces formules sont utilisées pour
produire les résultats de panel et pour calculer les paramètres CytoDiff à partir des résultats
exportés après l'acquisition.
Tableau B.3 Calcul des paramètres CytoDiff
B-4
Paramètre CytoDiff (% des GB)
Calcul reposant sur le nombre d'événements signalés sur les
régions après le gating sur l'histogramme respectif
Lymphocyte B
100 x (Ly.B REPORT / WBC REPORT)
Lymphocyte T/NK Total
100 x ((T- REPORT + T+) / WBC REPORT)
Lymphocyte T/NK CD 16 Positive
100 x (T+ / WBC REPORT)
Lymphocyte T/NK CD16 Negative
100 x (T- REPORT/WBC REPORT)
Total Lymphocyte
100 x (Lymph.Total REPORT / WBC REPORT)
Monocyte CD16 Positive
100 x (M+ / WBC REPORT)
Monocyte CD 16 Negative
100 x (M- REPORT/ WBC REPORT)
Total Monocyte
100 x (M- REPORT + M+/ WBC REPORT)
Immature Granulocyte
100 x (IG REPORT / WBC REPORT)
Eosonophil
100 x (EO / WBC REPORT)
Neutrophil Mature
100 x (CD 16+ / WBC REPORT)
Neutrophil Total
100 x (IG REPORT + CD16 + / WBC REPORT)
Xb
100 x (Xb / WBC REPORT)
Xt
100 x (Xt / WBC REPORT)
Xn
100 x (Xn / WBC REPORT)
Xm
100 x (Xm / WBC REPORT)
Blast Total
100 x ((Xb + Xt REPORT +Xn+ Xm) / WBC REPORT)
Basophil
100 x (BA / WBC REPORT)
A99719AD
Références
1. Faucher, J.L., Lacronique-Gazaille, C.,Frébet, E., Trimoreau, F, Donnard, M.,Bordessoule, D.,
Lacombe, F., Feuillard, J., 6 Markers/5 colors extended white blood cell differential by flow
cytometry. Cytometry Part A. 71A. 934-944. 2007.
2. Silverstein, R.L., La Salla, J., Pearce, S.F., “CD36 cluster workshop report”, 1995, Leucocyte
Typing V, White Cell Differentiation Antigens, Schlossman, et al.,Eds., Oxford University Press,
1269-1271.
3. Bierber, B.E., Bogart, R.E., Wolff, I.H.,Burkakoff, S.J., "Functional analysis of CD2 Mab reactivity",
1989, Leucocyte Typing IV, White Cell Differentiation Antigens. W.Knapp, et al., Eds., Oxford
University Press, p. 274-277.
4. Haynes, B.F., “Summary of T cell studies”, 1986, in Leukocyte Typing II, White Cell
Differentiation Antigen, Rheinherz, E.L., et al., Eds., Springer-Verlag, p. 3-30.
5. HLDA8, Leukocyte Typing 8 – in Press (2004) or www.hlda8.org.
6. Ritz, J., Trinchieri, G., Lanier, L.L., "NK-cell antigens: section report", 1995, Leucocyte Typing V,
White Cell Differentiation Antigens. Schlossman, S.F., et al., Eds., Oxford University Press, 13671372.
7. Pesando, J. M., Bouchard, L. S., McMaster, B. E., “CD19 is functionally and physically associated
with surface immunoglobulin”, 1989, J. Exp. Med., 170, 2159-2164.
8. “CD Guide “ Compiled by the organizing committee, 1989, Leucocyte Typing IV, White Cell
Differentiation Antigens. W. Knapp, et al., Eds., Oxford University Press,1078.
9. “Listing of all Fourth Workshop antibodies“, 1989, Leucocyte Typing IV, White Cell
Differentiation Antigens. W. Knapp, et al., Eds., Oxford University Press, 1094-1110.
10. Cobbold, S., Hale, G., Waldmann, H., "Nonlineage, LFA-1 family, and leukocyte common
antigens: New and previously defined clusters", 1987, Leucocyte Typing III, White Cell
Differentiation Antigens, McMichael A.J., et al., Eds., Oxford University Press, 788-803.
11. Behm, Frederick G., Campana, Dario, “Immunophenotyping of Leukemia”, September 2000,
Journal of Immunological Methods, Volume 243, Issues 1-2, 21, Pages 59-75.
12. Wagner C, Hansch GM., “Genetic deficiency of CD16, the low-affinity receptor for
immunoglobulin G, has no impact ont he functional capacity of Polymorphonuclear
Neutrophils”, 2004, Eur J Clin Invest. Feb; 34(2):149-55.
A99719AD
Références-1
Références
Références-2
A99719AD
Index
A
G
à propos de ce guide du système, -xv
accord de licence utilisateur final, Garantie-1
accord de licence, utilisateur final, Garantie-1
analyse des échantillons, 3-1
Applications d'auto-configuration, 1-3
auto-configuration du logiciel, 1-3
auto-configuration, logiciel, 1-3
autosetup
Protocoles et applications CytoDiff, 2-12
avant l'installation du logiciel, 2-1
globules rouges. Voir GR (globules rouges)
GR (globules rouges)
conditions pouvant empêcher la lyse, 5-1
GRAPHIQUES, -xvi
C
calculation of CytoDiff parameter, B-4
coloration et contrôle de la qualité, 3-1
conventions, -xvi
utilisées dans le manuel, -xvi
création de rapport de panel, 2-14
création de rapport, panel, 2-14
créer un nouveau panel, 2-14
I
installaltion
incomplète, 2-10
installation
annulation, 2-11
interrompue, 2-11
installation du logiciel
exigences, 2-1
irrégularités d'installation, 2-10
L
D
légende du protocole, 3-8
limitations du système, 5-1
linéarité, 4-2
lyse des globules rouges, 1-2
conditions pouvant empêcher la lyse, 5-1
définition d'une région automatisée, 3-12
détection de l'interférence de cellules autres
que des GB, 3-10
M
E
equivalence réactif, 4-2
erreur de protocole incorrect, A-3
exactitude de la méthode, 4-2
F
FC 500 avec logiciel CXP, -xv
fichier modèle de panel, format, 2-24
format du fichier modèle de panel, 2-24
manuel, mises à jour, iii
messages d'erreur dans la boîte de dialogue
Résultats de l’analyse, A-1
messages d’erreur, 3-13, A-1
messages, erreur, A-1
mesures supplémentaires, 3-21
méthode, exactitude de la, 4-2
mise à niveau à partir d'une version
antérieure, 2-2
modifier ou réparer la version de CytoDiff CXP
actuellement installée, 2-4
Index-1
Index
P
pages de flux, 3-4
Paramètre hématologique (%GB), 1-1
précautions, 5-1
précision, 4-4
première installation, 2-5
principes de test, 1-2
procédure de coloration et contrôle de la
qualité, 3-1
protocole de données, 3-1
protocoles déverrouillés, 1-4
protocoles, panels et applications, 2-12
R
réactifs, B-1
informations des notices, -xv
references, Références-1
réglage de région, 3-9
résultats de panel CytoDiff après détection
d'erreur, A-4
S
sang total normal (% GB), 4-1
Standardisation automatique
protocoles utilisés, 1-3
supprimer la version existante v1.0 du logiciel
CytoDiff CXP, 2-2
symboles de sécurité, -xvi
symboles, sécurité, -xvi
Système CytoDiff, 1-1
système, limitations, 5-1
U
usage prévu, 1-1
V
valeurs attendues, 4-1
valeurs, attendues, 4-1
vue d'ensemble des protocoles, 1-4
Index-2
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A99719AD
Garantie-1
Documents connexes
Guide du SYSTÈME logiciel CytoDiff CXP
Réf. A99719
• Utilisation et fonction
• Installation du logiciel/protocoles
• Composants du panel
• Analyse des échantillons
• Caractéristiques de performance
• Limitations/Avertissements
• Dépannage
• Index
Panel CytoDiff (mode d'emploi du réactif)
Réf. A84341
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