Cytiva™ CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi Traduit de l’anglais Introduction À lire avant de déballer ou d’utiliser le kit Ces instructions contiennent des informations importantes pour la manipulation, le déballage et la préparation en toute sécurité du Cytiva™ CD34+ HSC LNP kit, 2 mL. Avant d’utiliser ce produit, tous les utilisateurs doivent lire le présent document ainsi que le Mode d’emploi des instruments NanoAssemblr® Ignite™ et Ignite+™. Utilisation prévue Le Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL est destiné à la délivrance d'ARN dans des cellules souches hématopoïétiques humaines (CSH) stimulées. Le kit est fourni comme un produit autonome devant être utilisé uniquement en association avec l’instrument Ignite ou Ignite+ et les cartouches NxGen™Ignite. Les produits sont uniquement destinés à la recherche et ne peuvent pas être utilisés dans le cadre de procédures cliniques ou in vitro, ou à des fins diagnostiques ou thérapeutiques. Sécurité Pour une utilisation et une manipulation des produits en toute sécurité, se reporter à la fiche de données de sécurité (FDS) de chaque produit chimique utilisé dans la procédure. Scanner le code QR figurant sur l’emballage pour accéder à la FDS des composants. precisionnanosystems.com 1002516 Rev 1 Généralités Description Le Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL est un mélange de réactifs à base de nanoparticules lipidiques (NPL) qui est optimisé pour la délivrance d’ARN (tel que de l’ARNm de Cas9/ARNsg) dans des CSH humaines stimulées. Le kit Cytiva CD34+ HSC LNP inclut des réactifs qui sont utilisés avec l’instrument NanoAssemblrIgnite ou Ignite+ pour produire des NPL-ARN. Cette méthode de délivrance non virale peut être intégrée à des flux de travail de culture de CSH standard. Le kit Cytiva CD34+ HSC LNP permet aux chercheurs d'établir une méthode évolutive et cliniquement pertinente à l'échelle préclinique pour la délivrance et l’édition de gènes ex vivo. Le kit est approprié pour être utilisé dans le développement de thérapies à base de CSH modifiées par un gène. Applications typiques • Délivrance d’ARN pour exprimer des protéines d’intérêt • Délivrance d’ARNm de nucléase à des fins de manipulation génétique, par exemple une invalidation génique par CRISPR/Cas. • Délivrance d’ARNsi pour une extinction génique transitoire Produits associés Les produits suivants peuvent être utilisés avec l’instrument NanoAssemblr Spark™ pour des applications à l’échelle de la découverte et de la recherche. Produit Code produit Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 100 μL 1003000 Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 100 μL avec cartouches 1004000 Instrument NanoAssemblr Spark NIS0001 Documentation associée Document ID du document Mode d’emploi du NanoAssemblr Ignite et Ignite+ NIN1134 Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Workbook hsckitmrnaigniteWB-1223 RiboGreen Assay Protocol to Determine RNA Encapsulation Efficiency PNI-WB-S9-001-INT Genome Editing of CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cells with Lipid Nanoparticles HSC-AN-1123 Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 2 Accès à la documentation utilisateur en ligne Scanner le code QR ou consulter l’adresse precisionnanosystems.com/instructions. Composants du kit Composants et stockage Le tableau suivant indique les noms des composants et les températures de stockage pour tous les composants du kit. Étiquette Contenu Taille Stockage Lipid mix Mélange de lipides 2 ml -80 °C Formulation buffer type 1 Tampon de formulation 6 ml 2 °C à 8 °C Dilution buffer type 1 10X Tampon de dilution 100 ml 2 °C à 8 °C Cryopreservation buffer type 2 Tampon de cryoconservation 6 ml -80 °C Apolipoprotein-E3 (ApoE3) Apolipoprotéine-E3 (ApoE3) 500 µg -80 °C Date d’expiration Se reporter à l’emballage des composants individuels. Capacité du kit Jusqu’à 5 ml de formulation de nanoparticules lipidiques, ou environ 1 mg d’ARN chargé. Par exemple : • 5 x 1 ml de NPL • 1 x 5 ml de NPL Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 3 Matériel requis Matériel requis fourni par Precision NanoSystems Produit Code produit Instrument NanoAssemblrIgnite ou Ignite+ Ignite : NIS0001 Ignite+ : 1001413 Cartouches NanoAssemblr NxGen Ignite Paquet de 100 : NIN0061 Paquet de 200 : NIN0062 Matériel requis fourni par l’utilisateur Pour préparer les NPL-ARN avec le kit Cytiva CD34+ HSC LNP, l’équipement, les consommables et les réactifs suivants sont requis. • • • • • • • • • • • • • Lecteur de plaques en fluorescence Bloc chauffant ou étuve capable de chauffer à 55 °C Étuve, capable de chauffer à 37 °C Spectromètre UV Agitateur vortex Centrifugeuse réfrigérée avec rotor oscillant Tubes à centrifuger coniques - 15 et 50 ml Tubes de 0,5 à 2 ml avec capuchon à vis et joint torique Seringue jetable - 1, 3, 5 ou 10 ml Micropipettes et cônes de pipette exempts de RNase - 10, 20, 200 et 1000 µl Aiguilles émoussées Filtres à seringue - 13 mm, 0,2 µm, polyéthersulfone (PES) Filtres à centrifuger à seuil de coupure (MWCO) de 30 kDa Amicon®, 15 ml Remarque : • • • • • • • Un filtre à centrifuger par volume de 1,5 ml de NPL non diluées (45 ml diluées) est recommandé. L’utilisation de filtres supplémentaires ne réduit pas la récupération mais permet de gagner du temps pour le traitement en aval. Plaques à 96 puits à fond noir Quant-iTRiboGreen Assay Kit Triton X-100 Solution saline tamponnée au phosphate (PBS) 1X, sans calcium et magnésium Eau de qualité biologie moléculaire (exempte de RNase/DNase et d’endotoxines) Isopropanol à 70 % Solution de décontamination des RNases Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 4 Vue d’ensemble du flux de travail Cette section décrit le flux de travail pour préparer des NPL-ARN sur l’instrument Ignite et Ignite+, y compris la préparation de la solution d’ARN, la manipulation de l’instrument et la préparation des NPL. Un flux de travail typique utilisant un kit Cytiva CD34+ HSC LNP kit est indiqué dans le tableau cidessous. Phase Action Description 1 Remplissage du Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Workbook Calculer la consommation en réactifs et préparer le matériel 2 Préparation de l’espace de travail et des réactifs dans une enceinte de sécurité biologique Décongeler les réactifs et les matériels, étiqueter les flacons et paramétrer l’instrument 3 Préparation de la solution d’ARN Préparer la solution de travail d’ARN en combinant la charge utile d’ARN et le tampon de formulation inclus 4 Formulation des NPL-ARN Formuler les NPL sur l’instrument 5 Traitement en aval des NPL Nettoyer la formulation par un échange de tampon en utilisant un filtres à centrifuger à seuil de coupure (MWCO) 6 Quantification de l’ARN chargé Quantifier l’ARN encapsulé à l’aide de l’essai RiboGreen 7 Traitement des CSH par les NPL Ajouter les NPL-ARN aux cellules Remplissage de la feuille de calcul Le Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Workbook est un outil permettant de calculer les paramètres et les volumes pour la formulation des NPL sur l’instrument Ignite et Ignite+. Le Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Workbook est également appelé Feuille de calcul dans le présent document. La Feuille de calcul est disponible sur Internet. Voir Accès à la documentation utilisateur en ligne, à la page 3. La feuille de calcul est divisée en deux sections pour tenir compte des deux applications indiquées cidessous, et l’utilisateur doit uniquement remplir les entrées sous l’en-tête de section pertinent : 1 2 1. Pour l’expression d’ARNm 2. Pour l’édition par CRISPRCas9 (avec l’ARNm de Cas9 et un ARNsg) Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 5 À l’étape 1, l’utilisateur doit saisir les valeurs des paramètres indiqués ci-dessous. Les valeurs recommandées pour ces paramètres sont indiquées dans le tableau. Paramètre Description Valeur recommandée Total LNP volume (mL) Volume de la formulation de NPL résultant de la procédure Supérieure à 0,5 ml Stock mRNA concentration (mg/ mL)1 Concentration de la solution mère d’ARNm Déterminée par l’utilisateur Stock Cas9 mRNA concentration (mg/ mL)2 Concentration de la solution mère d’ARNm de Cas9 Déterminée par l’utilisateur Stock sgRNA concentration (mg/ mL)2 Concentration de la solution mère d’ARNsg Déterminée par l’utilisateur Cas9 to sgRNA ratio (wt.)2 Rapport en poids de l’ARNm de Cas9 sur l’ARNsg 1:1 Samples (number of replicate LNPs) Nombre de réplicats d’échantillons de NPL Déterminée par l’utilisateur Remarque : Une concentration mère d’ARNsg couramment utilisée est de 100 µM ou approximativement 3,2 mg/ml pour les produits de recombinaison de synthèse. 1 Pour l’expression d’ARNm uniquement 2 Pour l'édition par CRISPRCas9 uniquement Les calculs optimisés présentés dans la Feuille de calcul utilisent un débit total de 12 ml/min, un rapport de débit de 2:1, et un volume de déchets de départ de 10 %. Préparation de l’espace de travail et des réactifs Il est important de maintenir la stérilité de l’ensemble du matériel et d’effectuer tous les travaux dans l’enceinte de sécurité biologique (ESB). Les cellules souches hématopoïétiques sont particulièrement sensibles aux pyrogènes, tels que les endotoxines, et ce même à des taux minimalement détectables. Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 6 Suivre les étapes ci-dessous pour préparer l’espace de travail et les réactifs. Étape Action 1 Mettre sous tension et nettoyer l’ESB en l’essuyant avec de l’isopropanol à 70 % et une solution de décontamination des RNases. 2 Récupérer l’aliquote ou les aliquotes d’ARN congelée(s) puis la/les décongeler sur de la glace. Toujours conserver l’ARN sur de la glace afin d’empêcher toute dégradation du matériel. 3 Décongeler le mélange de lipides à 55 °C pendant 5 minutes dans un bain à billes ou un bloc chauffant. Après la décongélation, conserver le mélange de lipides à température ambiante dans l’ESB. Conserver le flacon fermé pour empêcher toute évaporation. 4 Agiter le mélange de lipides au vortex pour garantir une parfaite homogénéité. Centrifuger dans une microcentrifugeuse pendant 3 à 5 secondes. 5 Placer les éléments suivants dans l’ESB : Sur de la glace : À température ambiante : • Aliquote(s) • Un tube conique de 15 ml pour chaque échantillon de NPL et d’ARN un tube supplémentaire pour les déchets • Les composants du kit : mélange de lipides, tampon de formulation et tampon de dilution • Quatre tubes pour chaque échantillon de NPL, dimensionnés et étiquetés de manière appropriée pour le matériel suivant : - Solution d’ARN : un tube pour la solution aqueuse d’ARN (1 à 15 ml) - Échantillon concentré : un tube de collecte pour l’échantillon de NPL-ARN, avant la filtration à 0,2 μm (1 à 15 ml) - Échantillon RiboGreen : un tube de collecte pour une petite aliquote de NPL-ARN afin de réaliser l’essai RiboGreen (~20 à 25 μL) - Échantillon final : un tube de collecte pour l’échantillon de NPL-ARN, pour les NPL-ARN restantes pour la culture cellulaire après la filtration à 0,2 μm (1 à 15 ml) • Micropipettes de 200 μl et 1 ml et cônes de pipette stériles • Filtres à centrifuger à seuil de coupure (MWCO) • Seringues, aiguilles et filtres de 0,2 µm Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 7 Étape Action 6 Préparer le tampon de dilution 1X dans un tube en fonction des volumes du tampon de dilution 10X (1) et de l’eau de qualité biologie moléculaire (2) indiqués à l’étape 2 de la Feuille de calcul. 1 2 7 Dans l’ESB, préparer les filtres à seuil de coupure (MWCO) de la manière suivante : a. Rincer les filtres avec de l’isopropanol à 70 %. b. Centrifuger environ 15 ml d’eau de qualité biologie moléculaire ultra-pure à travers le filtre à 4000 x g pendant 5 minutes. Remarque : La centrifugation à l’eau élimine les conservateurs de la membrane et permet de s’assurer de l'intégrité de la membrane. Si l’eau traverse complètement le filtre, il est possible que la membrane soit compromise ; le filtre doit alors être jeté. Préparation de la solution d’ARN Introduction Cette section décrit la procédure de préparation de la solution d’ARN. Il existe deux procédures différentes en fonction du type d’ARN. Toutes les étapes doivent être réalisées dans une ESB afin de minimiser la contamination bactérienne et toute croissance potentielle dans les solutions. Avant de commencer, mesurer la concentration de la ou des solution(s) mère d’ARN par UV-Vis afin de s’assurer que la concentration est bien celle prévue. Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 8 Préparation d’ARNm pour une délivrance à un seul composant Étape Action 1 Pipeter les volumes de tampon de formulation (1) et d’eau de qualité biologie moléculaire (2) indiqués à l’étape 3 de la Feuille de calcul dans un tube pour la solution d’ARN. 1 2 3 2 Bien mélanger. 3 Pipeter les volumes d’ARNm (3) indiqués à l’étape 3 de la Feuille de calcul dans le tube de solution d’ARN. Conserver la solution mère d’ARN sur de la glace jusqu’à utilisation. Préparation d’ARNm pour une délivrance à deux composants Étape Action 1 Pipeter les volumes de tampon de formulation (1) et d’eau de qualité biologie moléculaire (2) indiqués à l’étape 3 de la Feuille de calcul dans un tube pour la solution d’ARN. 1 2 3 4 2 Bien mélanger. 3 Pipeter les volumes d’ARNm de Cas9 (3) et d’ARNsg (4) indiqués à l’étape 3 de la Feuille de calcul dans le tube de solution d’ARN. Conserver la solution mère d’ARN sur de la glace jusqu’à utilisation. Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 9 Formulation de NPL-ARN Suivre les étapes ci-dessous pour formuler les NPL-ARN sur l’instrument Ignite et Ignite+. Étape Action 1 Mettre l’instrument sous tension comme décrit dans son Mode d’emploi. 2 Dans le menu principal, appuyer sur Quick Run (Cycle rapide). 3 Saisir les paramètres calculés indiqués à l’étape 5 de la Feuille de calcul. Se reporter au Mode d’emploi de l’instrument pour plus de détails. 4 Insérer la cartouche NxGen dans l’instrument. 5 Préparer la seringue R avec le mélange de lipides : a. Choisir la taille de seringue selon le volume spécifié pour la seringue R à l’étape 5 de la Feuille de calcul. b. Aspirer la quantité de mélange de lipides requise dans la seringue en utilisant une aiguille émoussée propre. c. Retirer l’aiguille de la seringue, et tapoter la seringue pour éliminer les éventuelles bulles d’air. d. À l’aide du piston, pousser le liquide dans la seringue en veillant à éviter tout écoulement au niveau de la pointe de la seringue. 6 Préparer la seringue C avec la solution aqueuse : a. Choisir la taille de seringue selon le volume spécifié pour la seringue C à l’étape 5 de la Feuille de calcul. b. À partir du tube de solution d’ARN, aspirer la totalité de la solution dans la seringue en utilisant une aiguille émoussée propre. c. Vérifier que le volume approprié est présent dans la seringue C. d. En laissant l’aiguille en place, tapoter la seringue pour éliminer les éventuelles bulles d’air. e. À l’aide du piston, pousser le liquide dans la seringue en veillant à éviter tout écoulement au niveau de la pointe de la seringue. Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 10 Étape Action 7 Continuer à raccorder les seringues et commencer la procédure de formulation sur l’instrument comme décrit dans son Mode d’emploi. Traitement en aval des NPL Une fois la formulation sur l’instrument terminée, suivre les étapes ci-dessous pour traiter les NPL en aval et facultativement préparer l’échantillon final pour un stockage de longue durée à -80 °C. Étape Action 1 Effectuer une dilution 30X des NPL-ARN avec un tampon de dilution 1X dans l’ESB. 2 Remplir le ou les filtres à centrifuger à seuil de coupure (MWCO) avec les NPL-ARN diluées, comme calculé à l’étape 6. 3 Centrifuger à 4000 x g pendant 10 minutes à 4 °C dans un rotor à godets oscillants. Remarque : Des vitesses moins élevées sont acceptables mais augmentent le temps de traitement. 4 Jeter la solution se trouvant en dessous de l’unité de filtration et répéter l’étape 3 si nécessaire jusqu’à ce que la totalité de l’échantillon soit reconcentrée à environ le volume de NPL-ARN de départ. 5 Dans l’ESB, récupérer l’échantillon contenu dans le filtre à l’aide d’une micropipette. 6 Laver la membrane du filtre à centrifuger à seuil de coupure (MWCO) avec environ 100 à 200 µl de tampon de dilution 1X pour augmenter la récupération des NPL-ARN. 7 Pipeter l’échantillon dans un tube exempt de RNase. 8 Facultatif. Préparer les NPL-ARN pour un stockage de longue durée : a. Diluer des aliquotes des NPL à 1:1 avec le tampon de cryoconservation inclus dans le kit. b. Mélanger minutieusement les NPL avec le tampon en pipetant de haut en bas à cinq reprises au minimum. Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 11 Étape Action 9 Dans l’ESB, filtrer l'échantillon concentré en plaçant un filtre stérile de 0,2 µm dans le tube de l’échantillon final. Astuce : Pour maximiser la récupération des NPL : a. Humidifier le filtre avec de petites quantités de tampon de dilution 1X (conservé dans une seringue distincte). b. Filtrer l’échantillon de NPL. c. Filtrer à nouveau 100 à 200 µl de tampon de dilution 1X après la collecte de l’échantillon de NPL. d. Enfin, introduire de l’air dans le filtre à deux ou trois reprises pour garantir la collecte de toutes les NPL résiduelles. Remarque : L’utilisation de plusieurs filtres de 0,2 µm peut être nécessaire pour des volumes d'échantillon plus importants. L’utilisation de plusieurs filtres ne devrait avoir aucun impact sur le rendement en NPL-ARN. 10 Aliquoter 25 µl de NPL-ARN dans le tube pour l’échantillon RiboGreen. 11 Déterminer la concentration en ARN des NPL à l’aide de l’essai RiboGreen. Se reporter au RiboGreen Assay Protocol to Determine RNA Encapsulation Efficiency , disponible sur Internet, pour obtenir des instructions détaillées. Voir Accès à la documentation utilisateur en ligne, à la page 3. 12 Facultatif : mesurer la taille des particules par diffusion dynamique de la lumière (DLS). Les NPL-ARN sont désormais prêtes à être utilisées. Pour un stockage de courte durée, conserver l’échantillon à 4 °C et l’utiliser pour le traitement cellulaire dans un délai d’une (1) semaine au maximum. Pour un stockage de longue durée, conserver les NPL-ARN formulées dans le tampon de cryoconservation à -80 °C pendant un mois au maximum. Remarque : Toute conservation pendant plus d’un mois nécessite de procéder à des tests. Traitement des CSH par les NPL Vue d’ensemble L’illustration ci-dessous représente un schéma fonctionnel du flux de travail de la culture cellulaire des CSH et du traitement par les NPL. Les moments temporels suggérés dans le flux de travail sont basés sur des modèles expérimentaux d’invalidation de CD45 et CD33. Se reporter au document Genome Editing of CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cells with Lipid Nanoparticles pour plus de détails. Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 12 Purification et stimulation Traitement par les NPL pour l’édition génique Ensemencement d’UFC Détection de l’invalidation Comptage des UFC Jour ~3-5 Jour 8 14 jours après l’ensemencement LNPs CD34+ cells Jour 0 Jour 1 Recommandations pour la culture cellulaire Pour obtenir une efficacité de transfection optimale des NPL, tenir compte des paramètres essentiels suivants : • Dosage des NPL-ARN : il est recommandé d’effectuer une titration complète de la dose pour chaque charge utile afin d’identifier la dose optimale. Une charge utile peut être, par exemple, une construction d’ARN guide unique différente. La plage recommandée pour la dose de titration peut aller de 0,2 à 20 µg d’ARN total par million de cellules traitées. • Pratique stérile : maintenir un environnement de travail stérile lors de la manipulation des cellules et des NPL. Les opérateurs doivent être dûment formés à la technique stérile appropriée avant de travailler dans l’enceinte de sécurité biologique. • Décongélation et expansion des cellules : les CSH CD34+ cryoconservées doivent être stimulées pendant 24 heures après la décongélation (avant l’ajout des NPL). • Densité cellulaire : une densité d’ensemencement de 0,1 à 0,5 million de cellules/ml est recommandée pour le traitement des NPL. • Temps de traitement des NPL : le temps d’incubation après la transfection des NPL dépend des caractéristiques de la charge utile d’ARN, par exemple de la cinétique d’expression et de la stabilité. Un traitement de 24 à 96 heures est recommandé, avec une optimisation supplémentaire si nécessaire. • Milieux de culture cellulaire : le kit Cytiva CD34+ HSC LNP montre une performance optimale dans des milieux exempts de sérum. Un milieu de culture cellulaire contenant une faible concentration de sérum (≤ 1 %) au moment de l'ajout des NPL peut être acceptable, mais doit être validé de manière expérimentale. En outre, l’utilisation d'un milieu exempt de sérum est recommandée pour une rétention optimale du caractère souche et d’un phénotype greffable (CD34+ CD38CD90+ CD133+). Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 13 Procédure de traitement par des NPL Les étapes ci-dessous offrent une vue d’ensemble de la procédure de traitement par des NPL. Se reporter au document Genome Editing of CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cells with Lipid Nanoparticles pour obtenir un exemple de flux de travail détaillé, qui a été optimisé pour le traitement de CSH par des NPL, ainsi que des conseils pour la résolution des problèmes. Voir la Documentation associée, à la page 2. Étape Action 1 Décongeler ou isoler les CSH CD34+. 2 Diluer les cellules à 0,1 à 0,5 million de cellules/ml dans un milieu de culture cellulaire. 3 Le jour suivant, juste avant le traitement par les NPL, ajouter de l’ApoE aux cellules de la manière suivante : a. Préparer une solution mère d’ApoE à 0,1 mg/ml en diluant les 500 µg d’ApoE inclus avec 5 ml de PBS 1X sans calcium ou magnésium. Conserver en aliquotes à -80 °C pendant 2 mois au maximum pour éviter les cycles de congélation/décongélation. b. Ajouter la solution mère d’ApoE aux cellules pour obtenir une concentration finale de 1 µg/ml (dilution à 1:100 de la solution mère à 0,1 mg/ml). c. Mélanger minutieusement par trituration. 4 Ensemencer les cellules dans un récipient de culture ou une plaque multipuits. 5 Ajouter les NPL formulées directement aux cellules ensemencées. 6 Incuber à 37 °C dans du CO2 à 5 %. 7 Effectuer une analyse en aval pour évaluer l’efficacité de la transfection, par exemple via une cytométrie en flux ou un essai d’unités formant colonies. Informations de commande Pour obtenir les informations les plus récentes, consulter le site precisionnanosystems.com. Nom Code produit Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL 1005000 Instrument NanoAssemblr Ignite NIN0001 Instrument NanoAssemblr Ignite+ 1001413 Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 100 μL 1003000 Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 100 μL avec cartouches 1004000 Cartouches NanoAssemblr NxGen Ignite - paquet de 100 NIN0061 Cartouches NanoAssemblr NxGen Ignite - paquet de 200 NIN0062 Cytiva CD34+ HSC LNP kit, 2 mL Mode d’emploi 1002516 Rev 1 14 Page laissée intentionnellement vide Page laissée intentionnellement vide precisionnanosystems.com Ignite, Ignite+, NanoAssemblr, NxGen et Spark sont des marques de commerce de Precision NanoSystems. Cytiva est une marque de commerce de Life Sciences IP Holdings Corporation ou de l’une de ses sociétés affiliées opérant sous le nom de Cytiva. Amicon est une marque de commerce de Merck KGaA. Triton est une marque de commerce de Union Carbide Corporation. RiboGreen et Quant-iT sont des marques de commerce de Thermo Fisher Scientific. Toute autre marque commerciale tierce est la propriété de son détenteur respectif. © 2024 Precision NanoSystems Pour les coordonnées des bureaux locaux, visiter le site precisionnanosystems.com 1002516 Rev 1 V:4 03/2024 ">
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