4.C. Étapes de purification (suite)
17. Si l’option de transférer les échantillons dans une plaque ou des tubes finaux a été sélectionnée, un message s’affiche pour demander à l’utilisateur de centrifuger la plaque intermédiaire à 2 500 × g pendant 20 minutes afin d’éliminer les particules résiduelles.
18. La plaque intermédiaire est replacée dans l’appareil, puis les éluats sont transférés aux tubes finaux ou à la plaque finale.
19. La méthode est terminée.
5. Résultats du développement
Les données décrites ci-dessous sont représentatives de plusieurs groupes de données obtenues au cours du développement. Le traitement de tous les échantillons présentés a été démarré dans des tubes de 50 ml. Les éluats obtenus ont été laissés sur la plaque intermédiaire pour l’analyse.
5.A. Rendement de la purification automatisée
La quantité d’ADN obtenue avec le système de purification automatisé de l’ADN ReliaPrep™ présente un rapport linéaire avec le volume initial de l’échantillon, tout au long de la plage recommandée de volume de départ. Les
échantillons présentés à la Figure 1 proviennent d’un seul donneur. Chaque échantillon a été traité à l’aide du système automatisé ReliaPrep™.
300
250
200
150
100
50
0
0 2
1.0
4 6
Rendement moyen (µg)
Rapport 260/280 moyen
Rapport 260/230 moyen
8
Volume initial de sang (ml)
10 12
0.5
0
2.0
1.5
Figure 1. Rendement en ADN par la procédure automatisée en fonction du volume de départ. Les
échantillons de couches leucocytaires ont été préparés à partir d’un seul donneur. Chaque point est la moyenne de quatre réplicats et les barres d’erreur représentant un écart-type. Rendements en ADN déterminé à l’aide du spectrophotomètre NanoDrop
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