G
ro
ss
er
on
Gélose de MAYEUX, SANDINE et ELLIKER
DOMAINE D’UTILISATION / HISTORIQUE
Ce milieu, mis au point en 1962 par Mayeux, Sandine et Elliker, est un milieu
lieu électif permettant
permettan la
recherche et le dénombrement des Leuconostoc dans le lait, les
es produits
ts laitiers et les aliments
alimen
alime
sucrés.
PRINCIPES
- L’azide de sodium provoque l’inhibition des germes
mes à Gram
ram négatif et des streptocoques
strepto
s
lactiques
associés aux Leuconostoc dans les produits laitiers.
- A partir du saccharose du milieu, Leuconostoc
dextranicum
conostoc mesenteroides
esenteroides et Leuconostoc
Leu
synthétisent des polysaccharides (dextranes)
anes) qui donnent
ent aux colonies un aspect gélatineux.
PREPARATION
- Mettre en suspension 138,5
38,5 g de
e milieu déshydraté (BK087)
(BK
(B
dans 1 litre d’eau distillée ou
déminéralisée.
- Porter lentement le milieu à ébullition
ullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps
nécessaire à sa dissolution.
solution.
- Répartir en tubess ou en flacons.
- Stériliser à l’autoclave
utoclave à 110°C pendant 20 minutes.
minu
min
NOTA :
Une liquéfaction
quéfaction
n partielle de l’agar entraînera
e
en
inévitablement une altération significative de la
consistance
stérilisation et refroidissement.
istance
tance du gel du milieu solidifié, après
a
MODE D’EMPLOI
-
Refroidir et maintenir
mainte le milieu à 47°C.
Couler en boîtes d
de Petri stériles.
Laisser solidifier ssur une surface froide.
Faire sécher à l'étuve, couvercle entrouvert.
Transférer
0,1 mL du produit à examiner et de ses dilutions décimales dans les boîtes.
ansférer
nsférer 0
Etaler
l’inoculum à la surface du milieu à l’aide d’un étaleur stérile.
er l’in
Incuber à 21°C, puis examiner chaque jour pendant 4 jours.
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Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France
Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr
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LECTURE
Leuconostoc dextranicum présente des colonies incolores, muqueuses, gélatineuses de 1 à 5 mm de
diamètre. Leuconostoc citrovorum et Leuconostoc kefir donnent de petites colonies incolores de 0,5 à
2 mm de diamètre. L’isolement soigneux et l’identification précise des espèces est indispensable
dans ces conditions. Après 4 jours d’incubation, les streptocoques lactiques peuvent se développer
sous forme de petites colonies opaques blanches ou blanc jaunâtre.
FORMULE - TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
G
ro
ss
er
on
Pour 1 litre de milieu :
- Tryptone .........................................................................................10,0 g
- Gélatine............................................................................................2,5
2,5 g
...5,0 g
- Extrait autolytique de levure.............................................................5,0
...100,0 g
- Saccharose ..................................................................................100,0
...........5,0
0g
- Glucose ............................................................................................5,0
...............1,0
.1,0 g
- Citrate de sodium .............................................................................1,0
...............75,0
0 mg
- Azide de sodium .........................................................................75,0
......................15,0
.......15,0 g
- Agar agar bactériologique ..............................................................15,0
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 6,9 ± 0,2.
CONTRÔLE QUALITE
- Milieu déshydraté : poudre blancc cassé, fluide
de et homogène.
homogène
- Milieu préparé : gélose blanc crème.
- Réponse culturale typique après 72
:
2 heures d’incubation à 21°C
21
2
Microorganismes
oorganismes
Croissance
Leuconostocc mesenteroides
eroides subsp. mesenteroides
mesenter
Leuconostoc
stoc mesenteroides
tero
subsp.
sp. cremor
ccremoris
Leuconostoc
dextranicum
nostoc mesenteroides
esenteroi
subsp.
p. dext
d
Escherichia
herichia coli
Lactococcus
actococcuss lactis
lacti subsp.
p lactis
ATCC® 14935
ATCC 19254
ATCC 19255
ATCC 25922
ATCC 11454
PR t 70%
PR t 70%
PR t 70%
inhibée, score 0
inhibée, score 0
STOCKAGE / CONSERVAT
CONSERVATION
CONSERVATI
Milieu déshydraté : 2-30°C.
2
2-3
péremption est mentionnée sur l’étiquette.
- La date de pérem
péremp
- Milieu préparé e
en flacons : 6 mois à 2-8°C (à titre indicatif).
- Milieu prépar
préparé en boîtes : 15 jours à 2-8°C (à titre indicatif).
PRESENTATION
Code
Milieu déshydraté :
- Flacon de 500 g
BK087HA
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REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
Mayeux, J.V., Sandine, W.E., and Elliker, P.R. 1962. A selective medium for detecting Leuconostoc in mixed-strain starter
cultures. J. Dairy Science, 45: 655-656.
Buttiaux, R., Beerens, H., et Tacquet. 1962. Manuel des techniques bactériologiques. 4ème Ed. Flammarion, 455-458.
Devoyod, J.S., et Muller, M. 1969. La flore microbienne du fromage de Roquefort. Les streptocoques lactiques et les
Leuconostoc. Le lait, 49: 369-399.
FIL-IDF 149A. Juillet 1997. Levains lactiques de cultures de bactéries lactiques. Norme de composition.
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XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la production
des milieux de culture. Partie 2 : Guide général pour les essais de performance des milieux de culture.
Les mentions portées sur l’étiquette sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document.
Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2009-02-10.
Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BK087/F/2000-11 : 4.
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