Biokar diagnostics MAYEUX, SANDINE et ELLIKER Manuel utilisateur
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G ro ss er on Gélose de MAYEUX, SANDINE et ELLIKER DOMAINE D’UTILISATION / HISTORIQUE Ce milieu, mis au point en 1962 par Mayeux, Sandine et Elliker, est un milieu lieu électif permettant permettan la recherche et le dénombrement des Leuconostoc dans le lait, les es produits ts laitiers et les aliments alimen alime sucrés. PRINCIPES - L’azide de sodium provoque l’inhibition des germes mes à Gram ram négatif et des streptocoques strepto s lactiques associés aux Leuconostoc dans les produits laitiers. - A partir du saccharose du milieu, Leuconostoc dextranicum conostoc mesenteroides esenteroides et Leuconostoc Leu synthétisent des polysaccharides (dextranes) anes) qui donnent ent aux colonies un aspect gélatineux. PREPARATION - Mettre en suspension 138,5 38,5 g de e milieu déshydraté (BK087) (BK (B dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée. - Porter lentement le milieu à ébullition ullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution. solution. - Répartir en tubess ou en flacons. - Stériliser à l’autoclave utoclave à 110°C pendant 20 minutes. minu min NOTA : Une liquéfaction quéfaction n partielle de l’agar entraînera e en inévitablement une altération significative de la consistance stérilisation et refroidissement. istance tance du gel du milieu solidifié, après a MODE D’EMPLOI - Refroidir et maintenir mainte le milieu à 47°C. Couler en boîtes d de Petri stériles. Laisser solidifier ssur une surface froide. Faire sécher à l'étuve, couvercle entrouvert. Transférer 0,1 mL du produit à examiner et de ses dilutions décimales dans les boîtes. ansférer nsférer 0 Etaler l’inoculum à la surface du milieu à l’aide d’un étaleur stérile. er l’in Incuber à 21°C, puis examiner chaque jour pendant 4 jours. 1/3 Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr )7 LECTURE Leuconostoc dextranicum présente des colonies incolores, muqueuses, gélatineuses de 1 à 5 mm de diamètre. Leuconostoc citrovorum et Leuconostoc kefir donnent de petites colonies incolores de 0,5 à 2 mm de diamètre. L’isolement soigneux et l’identification précise des espèces est indispensable dans ces conditions. Après 4 jours d’incubation, les streptocoques lactiques peuvent se développer sous forme de petites colonies opaques blanches ou blanc jaunâtre. FORMULE - TYPE (pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales) G ro ss er on Pour 1 litre de milieu : - Tryptone .........................................................................................10,0 g - Gélatine............................................................................................2,5 2,5 g ...5,0 g - Extrait autolytique de levure.............................................................5,0 ...100,0 g - Saccharose ..................................................................................100,0 ...........5,0 0g - Glucose ............................................................................................5,0 ...............1,0 .1,0 g - Citrate de sodium .............................................................................1,0 ...............75,0 0 mg - Azide de sodium .........................................................................75,0 ......................15,0 .......15,0 g - Agar agar bactériologique ..............................................................15,0 pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 6,9 ± 0,2. CONTRÔLE QUALITE - Milieu déshydraté : poudre blancc cassé, fluide de et homogène. homogène - Milieu préparé : gélose blanc crème. - Réponse culturale typique après 72 : 2 heures d’incubation à 21°C 21 2 Microorganismes oorganismes Croissance Leuconostocc mesenteroides eroides subsp. mesenteroides mesenter Leuconostoc stoc mesenteroides tero subsp. sp. cremor ccremoris Leuconostoc dextranicum nostoc mesenteroides esenteroi subsp. p. dext d Escherichia herichia coli Lactococcus actococcuss lactis lacti subsp. p lactis ATCC® 14935 ATCC 19254 ATCC 19255 ATCC 25922 ATCC 11454 PR t 70% PR t 70% PR t 70% inhibée, score 0 inhibée, score 0 STOCKAGE / CONSERVAT CONSERVATION CONSERVATI Milieu déshydraté : 2-30°C. 2 2-3 péremption est mentionnée sur l’étiquette. - La date de pérem péremp - Milieu préparé e en flacons : 6 mois à 2-8°C (à titre indicatif). - Milieu prépar préparé en boîtes : 15 jours à 2-8°C (à titre indicatif). PRESENTATION Code Milieu déshydraté : - Flacon de 500 g BK087HA 2/3 Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr )7 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Mayeux, J.V., Sandine, W.E., and Elliker, P.R. 1962. A selective medium for detecting Leuconostoc in mixed-strain starter cultures. J. Dairy Science, 45: 655-656. Buttiaux, R., Beerens, H., et Tacquet. 1962. Manuel des techniques bactériologiques. 4ème Ed. Flammarion, 455-458. Devoyod, J.S., et Muller, M. 1969. La flore microbienne du fromage de Roquefort. Les streptocoques lactiques et les Leuconostoc. Le lait, 49: 369-399. FIL-IDF 149A. Juillet 1997. Levains lactiques de cultures de bactéries lactiques. Norme de composition. G ro ss er on XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la production des milieux de culture. Partie 2 : Guide général pour les essais de performance des milieux de culture. Les mentions portées sur l’étiquette sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document. Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2009-02-10. Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis. Code document : BK087/F/2000-11 : 4. 3/3 Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr )7 ">

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