PRAXISDIENST test Mode d'emploi

NADAL® Vitamin D Quant Test
(test cassette)
REF 2260004NBUL-25
Návod k použití
25
6
Symbols
31
Instructions d’utilisation
9
Our Teams
32
es
Instrucciones de uso
13
it
Istruzioni per l’uso
17
pl
Sposób użycia
21
Gebrauchsanweisung
2
en
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Version 1.0, 2022-05-24
de
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NADAL® Vitamin D Quant Test (Réf. 2260004NBUL-25)
FRANÇAIS
1. Domaine d’application
Le test NADAL® Vitamin D Quant est un test à flux latéral pour
la détermination quantitative de la 25-hydroxyvitamine D (25OH vitamine D) dans le sang capillaire ou le sérum humain. Le
test est destiné au dépistage de la carence en vitamine D. La
chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie
de masse en tandem (LC-MS/MS) ou d’autres immunodosages
quantitatifs sont recommandés pour confirmer de manière
plus approfondie les résultats des tests de diagnostic. La
mesure quantitative et l’interprétation du résultat du test sont
effectuées à l’aide du lecteur Colibri Point-of-Care. Le test est
réservé à un usage professionnel.
2. Introduction et signification clinique
La vitamine D est une hormone stéroïde responsable de
l’amélioration de l’absorption du calcium dans l’intestin et de
la régulation de l’homéostasie calcique. Les deux formes
habituelles de vitamine D sont la vitamine D2 et la vitamine
D3. La vitamine D3 est produite naturellement dans la peau
humaine sous l’effet de la lumière ultraviolette, tandis que la
vitamine D2 est principalement absorbée par l’alimentation.
La vitamine D est transportée vers le foie, où elle est
métabolisée en 25-OH vitamine D. Le test sanguin de 25-OH
vitamine D est utilisé pour déterminer la concentration de
vitamine D dans le corps. La concentration sanguine de 25-OH
vitamine D est considérée comme le meilleur indicateur du
taux de vitamine D.
La carence en vitamine D est désormais reconnue comme une
épidémie mondiale. Pratiquement toutes les cellules du corps
humain possèdent des récepteurs de la vitamine D, ce qui
signifie qu’elles ont toutes besoin d’une quantité suffisante de
vitamine D pour fonctionner correctement. Les risques pour la
santé associés à une carence en vitamine D sont bien plus
graves qu’on ne le pensait jusqu’à présent. Une carence en
vitamine D est associée à plusieurs maladies graves :
ostéoporose, ostéomalacie, sclérose en plaques, maladies
cardiovasculaires, complications de la grossesse, diabète,
dépression, accidents vasculaires cérébraux, maladies autoimmunes, grippe, COVID-19, maladies infectieuses, différents
types de cancer, maladie d’Alzheimer, obésité, taux de
mortalité élevé, etc. C’est pourquoi la mesure du taux de 25OH vitamine D est aujourd’hui considérée comme une
nécessité médicale, et le maintien d’un taux suffisant est
considéré comme essentiel non seulement pour améliorer la
santé osseuse, mais aussi pour la santé et le bien-être en
général.
Plusieurs organisations de santé ont publié des lignes
directrices sur la carence en vitamine D, mais aucune
recommandation générale n’a encore été formulée. Dans la
littérature récente, les plages suivantes sont proposées pour
classifier le statut en vitamine D :
Niveau de
25-OH vitamine D
Plage de référence
(ng/mL)
Plage de référence
(nmol/mL)
Carence
0-10
0-25
Insuffisant
10-30
25-75
Suffisant
30-100
75-250
Excessif, mais non
toxique
100-150
250-375
Toxique
>150
>375
3. Principe du test
Le test NADAL® Vitamin D Quant permet la détermination
quantitative de la 25-OH vitamine D en évaluant l’intensité de
couleur de la ligne de test. Le test NADAL® Vitamin D Quant
est un test immunochromatographique basé sur deux
anticorps monoclonaux spécifiques dirigés contre la 25-OH
vitamine D, l’un étant conjugué à de l’or colloïdal et l’autre
étant immobilisé sur la membrane de test. La formation de la
coloration de la ligne de test en fonction de la concentration
permet une détermination rapide et quantitative de la 25-OH
vitamine D dans le sang capillaire ou le sérum humain.
Tandis que l’échantillon migre par capillarité le long de la
membrane dans la cassette de test, le conjugué d’or anti-25OH vitamine D coloré forme un complexe avec la 25-OH
vitamine D de l’échantillon. Ce complexe continue à migrer le
long de la membrane jusqu’à la zone de test (T), où il est
capturé par un autre anti-25-OH-vitamine D immobilisé sur la
membrane, ce qui entraîne la formation d’une ligne de
couleur rose/violette. L’intensité de la ligne colorée dans la
zone de test est en corrélation avec la concentration en 25-OH
vitamine D : plus la concentration en 25-OH vitamine D est
élevée dans l’échantillon testé, plus l’intensité de la ligne de
test est importante. La fenêtre de lecture des résultats
contient une ligne de contrôle qui sert de procédure de
contrôle. Cette ligne colorée doit toujours apparaître dans la
zone de la ligne de contrôle (C) si la cassette de test est
conservée dans de bonnes conditions et si le test est effectué
correctement.
4. Réactifs et matériels fournis
 25 tests NADAL® Vitamin D Quant
 26 tubes avec tampon
 26 collecteurs de sang
 1 carte RFID
 1 notice d’utilisation
5. Matériel supplémentaire nécessaire
 Lancettes
 Tampons alcoolisés
 Lecteur Colibri Point-of-Care
 Chronomètre (sauf si le chronomètre intégré au Colibri est
utilisé)
 Contrôle de vitamine D
 Micropipette de 5 µL (à utiliser avec les échantillons de
sérum ou le contrôle de vitamine D)
6. Conservation et stockage des réactifs
Les kits de test doivent être conservés à une température
comprise entre 4° et 30°C et peuvent être utilisés jusqu’à la
date de péremption indiquée sur l’emballage fermé. Les
cassettes de test doivent rester dans leurs emballages fermés
jusqu’à utilisation, car elles sont sensibles à l’humidité. Ne pas
congeler les cassettes de test. Ne pas utiliser les tests après
expiration de la date de péremption figurant sur l’emballage.
Veiller à protéger les composants du kit de test contre toute
contamination. Les composants du kit de test ne doivent pas
être utilisés en présence de signes de contamination
microbienne ou de dépôts. Une contamination biologique des
pipettes, récipients ou réactifs peut entraîner des résultats
imprécis.
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NADAL® Vitamin D Quant Test (Réf. 2260004NBUL-25)
7. Avertissements et précautions
 Test réservé au diagnostic in vitro professionnel.
 Lire la notice d’utilisation attentivement avant de réaliser le
test.
 Ne pas utiliser le test après expiration de la date de
péremption figurant sur l’emballage.
 Ne pas utiliser les composants des tests si l’emballage
primaire est endommagé.
 Tests à usage unique.
 La bonne carte RFID doit être utilisée pour obtenir des
résultats fiables. Les cartes RFID sont spécifiques aux tests
et aux lots.
 Ne pas déposer d’échantillon sur la zone réactive (fenêtre
de lecture des résultats).
 Ne pas toucher la zone réactive (fenêtre de lecture des
résultats) afin d’éviter toute contamination.
 Éviter les contaminations croisées des échantillons en
utilisant un nouveau tube avec tampon et un nouveau
collecteur de sang pour chaque échantillon.
 Ne pas interchanger ou mélanger les composants de
différents kits.
 Ne pas manger, boire ou fumer dans la zone de
manipulation des échantillons et des kits.
 Lors de la manipulation des échantillons, porter des
vêtements de protection : blouse, gants à usage unique et
lunettes de protection.
 Manipuler tous les échantillons comme de potentiels
composants infectieux. Respecter les précautions relatives
aux risques microbiologiques pendant les manipulations
ainsi que les directives locales en vigueur concernant
l’élimination des déchets.
 Ce kit de test contient des produits d’origine animale. La
certification concernant l’origine et/ou l’état sanitaire des
animaux ne garantit pas l’absence totale d’agents
pathogènes transmissibles. Tous les produits utilisés pour
ce test doivent être considérés comme des matières
potentiellement infectieuses et sont à manipuler en
appliquant les mesures de protection nécessaires (par ex.
éviter d’avaler ou d’inhaler).
 La température peut influencer les résultats du test.
 Le matériel utilisé pour la réalisation des tests doit être
éliminé selon les directives locales en vigueur.
8. Recueil, préparation et conservation des échantillons
Préparation
Avant de réaliser le test, s’assurer que tous les composants
sont à température ambiante (voir « Conservation et
stockage »).
Prélèvement d’un échantillon de sang
 Laver la main du patient au savon et à l’eau tiède ou la
nettoyer avec un tampon alcoolisé et la laisser sécher.
 Sans toucher le point de ponction, masser la main sur sa
longueur en direction du bout du doigt du majeur ou de
l’annulaire.
 Piquer la peau avec une lancette stérile. Essuyer la première
goutte de sang.
 Frotter doucement la main du poignet vers la paume, puis
vers le doigt piqué, afin de former une goutte de sang ronde
à l’endroit de la piqûre.
 Recueillir 10 μL de sang à l’aide d’un collecteur de sang.
9. Procédure du test
Test de sang capillaire
Amener les tests, échantillons, tampons et/ou contrôles à
température ambiante avant la réalisation du test.
1. Retirer la cassette de son emballage fermé et l’utiliser le
plus rapidement possible. Les meilleurs résultats sont
obtenus si le test est exécuté immédiatement après
l’ouverture de l’emballage. Inscrire sur la cassette le
numéro d’identification du patient ou du contrôle.
2. Placer la cassette sur une surface
propre et plane.
3. Tapoter le tube avec tampon sur
une surface plane pour vous
assurer que tout le liquide se
trouve au fond du tube.
4. Retirer l’opercule d’aluminium de
la partie supérieure du tube avec
tampon.
5. Prélever le sang en suivant les
instructions ci-dessus (« Prélèvement d’un échantillon de
sang »). Toucher délicatement la
goutte de sang avec l’extrémité
du collecteur de sang. La force
capillaire aspire 10 µL de sang
dans le collecteur de sang, puis
s’arrête automatiquement.
6. Vérifier le niveau de sang dans le
collecteur de sang. Le tube
capillaire
à
l’intérieur
du
collecteur de sang doit être
entièrement rempli de sang.
7. Insérer
complètement
le
collecteur de sang dans le tube
avec
tampon
et
appuyer
fermement pour le fermer.
8. Agiter vigoureusement le tube
combiné de haut en bas 3 à 4 fois
pour transférer le sang du collecteur de sang dans le tube de
prélèvement, et le faire tourner
jusqu’à ce que les solutions soient
complètement mélangées.
9. Retirer le capuchon du collecteur
de sang.
10. Retourner le tube contenant
l’échantillon et déposer 3 gouttes
dans le puits de dépôt (S) de la
cassette de test en le comprimant
délicatement.
11. Lire et noter les résultats après 15
minutes à l’aide du lecteur Colibri
Point-of-Care (pour l’utilisation du
Colibri, consulter le manuel
correspondant).
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NADAL® Vitamin D Quant Test (Réf. 2260004NBUL-25)
FRANÇAIS
Remarques importantes :
 La température peut avoir une incidence sur les résultats
des tests. Les tests doivent donc être effectués à
température ambiante (si possible entre 21° et 24°C).
 Pour obtenir des résultats optimaux, s’assurer que
l’échantillon de sang est complètement mélangé avec le
tampon. Cela peut être déterminé en vérifiant la couleur
rouge uniforme du sang pré mélangé dans le tube avec
tampon et dans le collecteur de sang. Ne pas mélanger
suffisamment peut conduire à des résultats de test erronés.
 Une fois mélangé, le tube avec tampon doit être
légèrement comprimé afin de déposer trois gouttes pleines
d’échantillon dans le puits de dépôt (S).
 Les résultats doivent être évalués avec le lecteur Colibri
Point-of-Care exactement 15 minutes après le dépôt de
l’échantillon dans le puits de dépôt (S). Dans le cas
contraire, les résultats risquent d’être inexacts.
 Les échantillons de plasma ou de sang anticoagulés ne
doivent pas être utilisés pour le test NADAL® Vitamin D
Quant, car les anticoagulants influencent les résultats du
test.
Test avec contrôle de vitamine D / sérum :
Le test NADAL® Vitamin D Quant est conçu pour être utilisé
avec du sang prélevé au bout du doigt. Cependant, les
échantillons de contrôle de vitamine D ou de sérum peuvent
également être utilisés. Pour la préparation du test, voir les
étapes 1 à 4 de la section « Test d’un échantillon prélevé au
bout du doigt » (voir ci-dessus). Au lieu de prélever un
échantillon de sang au bout du doigt avec le collecteur de
sang, ajouter 5 μL de contrôle de vitamine D ou de sérum dans
le tube avec tampon à l’aide d’une micropipette (non fournie
avec le kit de test) et passer aux étapes 7 à 11 de la section
« Test d’un échantillon de sang prélevé au bout du doigt »
(voir ci-dessus).
Remarques importantes :
 Veiller à ce qu’exactement 5 µL de sérum/solution de
contrôle soient transférés dans le tube de prélèvement. Si
du liquide se trouve à l’extérieur de la pointe de la pipette,
l’essuyer délicatement avec une serviette en papier en
direction de la pointe de la pipette. En raison du faible
volume d’échantillon, même les plus petites variations de
volume peuvent entraîner un résultat de mesure imprécis.
Interprétation des résultats :
Le lecteur Colibri Point-of-Care calcule automatiquement le
résultat final sur la base de l’intensité détectée de la ligne de
test et de la courbe d’étalonnage enregistrée sur la carte RFID
correspondante. Le taux de 25-OH vitamine D est exprimé en
ng/mL. Les résultats obtenus avec le test NADAL® Vitamin D
Quant sont interprétés en fonction des catégories suivantes :
Niveau de 25-OH
vitamine D (ng/mL)
< 10,0 ng/mL
≥ 10,0 – < 30,0 ng/mL
≥ 30,0 – < 100,0 ng/mL
≥ 100,0 ng/mL
Catégorisation
CARENCE
INSUFFISANT
SUFFISANT
EXCESSIF OU TOXIQUE
10. Contrôle qualité
Un contrôle de procédure interne est inclus dans la cassette
de test : une ligne colorée dans la zone de la ligne de contrôle
(C) est considérée comme un contrôle interne. Elle confirme
que le volume de prélèvement est suffisant, que la
manipulation a été effectuée correctement et que l’étanchéité
de la membrane est appropriée.
Les Bonnes Pratiques de Laboratoire recommandent
l’utilisation de matériel de contrôle externe afin de garantir la
bonne performance du kit de test. Si les valeurs de contrôle
n’entrent pas dans la plage définie, les résultats du test
doivent être considérés comme non valides. Un kit de contrôle
composé de deux contrôles de vitamine D confirmés par LCMS/MS peut être acheté séparément.
11. Performance du test
Sensibilité :
La sensibilité du test NADAL® Vitamin D Quant est de 3 ng/mL
(7,5 nmol/L). La sensibilité a été déterminée en calculant la
moyenne plus 3,3 fois l’écart-type de 20 tests sériques
exempts de vitamine D.
Plage de détection :
La plage de détection du test NADAL® Vitamine D Quant avec
le lecteur Colibri se situe entre 3 ng/mL (7,5 nmol/L) et
100 ng/mL (250 nmol/L).
Précision :
La précision du test NADAL® Vitamin D Quant a été évaluée à
l’aide d’échantillons humains de sang du bout du doigt en
comparaison avec un test de référence 25-OH Vitamin D ELISA
avec des échantillons de sérum correspondants. Le résultat
comparatif a montré une régression linéaire avec une pente
de 1,02 et un coefficient de corrélation de 92 %. En résumé,
les résultats du test NADAL® sur des échantillons de sang
humain prélevé au bout du doigt présentent une bonne
concordance avec les résultats du test ELISA sur les
échantillons de sérum correspondants. La précision du test
NADAL® Vitamin D Quant a également été évaluée sur 20
échantillons de sérum en comparaison avec le test LC-MS/MS
(qui est la norme pour la mesure de la 25-OH vitamine D). Le
résultat de la comparaison a montré une régression linéaire
avec une pente de 0,98 et un coefficient de corrélation de
98 %. En résumé, les résultats du test NADAL® Vitamin D
Quant correspondent très bien aux valeurs réelles obtenues
avec un test LC-MS/MS.
Précision :
Intra-lot
Réplicats
Valeur
moy.
(ng/mL)
Écart type
(ng/mL)
CV (%)
Sérum
20
40,4
3,1
7,6 %
Sang n°1
10
33,0
2,5
7,6%
Sang n°2
10
38,7
3,9
10,1 %
Échantillon
Inter-lot
Échantillon
Nombre
de lots
Réplicats
Valeur
moy.
(ng/mL)
Écart
type
(ng/mL)
CV (%)
Sérum
n°1
3
60
33,0
4,7
14,3 %
Sérum
n°2
3
60
55,9
6,1
11,0 %
Sang 1
3
15
38,8
4,3
11,8 %
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NADAL® Vitamin D Quant Test (Réf. 2260004NBUL-25)
FRANÇAIS
Spécificité :
30 échantillons de sérum exempt de vitamine D ont été testés
et ont tous présenté des résultats négatifs, ce qui indique une
spécificité de 100 %.
Aucune interférence ou réactivité croisée avec la bilirubine, les
triglycérides, le cholestérol, la vitamine B12 et la vitamine C
n’a été observée.
12. R ésultats a endus
Le test NADAL® Vitamin D Quant est un test rapide quantitatif.
Le test est destiné au dépistage des personnes pour
déterminer leur taux de vitamine D. Ce test ne fournit qu’un
résultat analytique provisoire. La chromatographie en phase
liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LCMS/MS) ou d’autres immunodosages quantitatifs sont
recommandés pour confirmer le résultat analytique.
13. Bibliographie
1. Holick, MF. Vitamin D statues: Measurement, Interpretation and clinical
application. Ann. Epidemoil. 2009, 19(2):73-78.
2. Morris HA. Vitamin D: A Hormone for All Seasons – How much is enough? Clin.
Biochem. Rev., 2005, 26:21-32.
3. Moyad MA. Vitamin D: a rapid review. Dermatol Nurs. 2009, 21:25-30
4. Zerwekh JE. Blood biomarkers of vitamin D status. Am J. Clin Nutr. 2008, 87:1087S91S
5. Schöttker B, et al.Vitamin D and mortality: meta-analysis of individual participant
data from a large consortium of cohort studies from Europe and the United States.
BMJ. 2014, 348:g3656
6. Jenkinson C et at. High throughput LC-MS/MS method for the simultaneous
analysis of multiple vitamin D analytes in serum. Chromatogr B Analyt Technol
Biomed Life Sci 2016 Mar 1; 1014:56-63.
Rev.0, 2022-05-24 EB
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