ENR-RSP 29 FICHE TECHNIQUE Date: 21/04/2011 Révision : 00 Page : 1 sur 1 Réactif de Kovacs PRESENTATION Milieu prêt à l’emploi : Flacon compte goutte FCG 100ml Flacon compte goutte FCG 15ml DEFINITION Le réactif de KOVACS est destiné à la mise en évidence de la production d’indole à partir du Tryptophane par les bactéries qui possèdent une tryptophanase. CONSERVATION Les flacons se conservent pendant 2 ans entre 2°C et 8°C jusqu’à la date de péremption. PRINCIPE 1. La culture du germe à tester doit être effectuée sur des milieux riches en tryptophane (exemple : urée indole, eau peptonnée…). 2. De nombreuses bactéries peuvent décomposer le tryptophane en indole. 3. L’indole réagit avec le Diméthylamino-4-benzaldéhyde en entraînant l’apparition d’un anneau rouge à la surface du milieu, après ajout de quelques gouttes de réactif de kovacs. MODE D’EMPLOI 1. Laisser le réactif de KOVACS revenir à température ambiante. 2. Après croissance de la souche dans le milieu urée indole ou eau peptonnée, ajouter 4 à 5 gouttes de réactif de KOVACS. LECTURE La production d’indole se caractérise par l’apparition d’un anneau rouge en surface du milieu. Contrôle qualité Analyses physicochimiques : Aspect /Couleur Dépôt Analyses microbiologiques Microorganismes Escherichia coli ATCC 25922 Liquide jaune Absence de dépôt Croissance après 24 à 48h à 37°C Indole (+) Apparition d’un anneau rouge après ajout de quelques gouttes de réactif de Kovacs ">
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