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Legionella L8 (fréquence mensuelle) Kit de test Mode d'emploi 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) La bactérie legionella peut survivre dans des conditions environnementales très variées. Elle a été détectée dans de l'eau entre 6°C et 60°C. Les températures comprises entre 20°C et 45°C semblent favoriser sa prolifération. Ces organismes ne semblent pas se multiplier en dessous de 20°C et ne survivent pas au-dessus de 60°C. La legionella peut coloniser les eaux industrielles ainsi que les colonnes de refroidissement, de même que les systèmes à eau froide et chaude et toute autre installation utilisant ou contenant de l'eau. Afin de limiter la possibilité de créer des conditions susceptibles d'augmenter le risque d'exposition à cette bactérie, il est important de mettre en oeuvre des mesures visant à contrôler ce risque (a) qui excluent la prolifératon des organismes dans l'eau et (b) dans la mesure du possible, réduisent l'exposition aux gouttelettes d'eau et aux aérosols. Systèmes présentant des risques : • • • • • • • • Colonnes de refroidissement et condenseurs évaporatifs Systèmes à eau froide et chaude, notamment à jets Bains bouillonnants et spas Bains à remous Fontaines et pièces d'eau intérieures Systèmes de nébulisation utilisés en horticulture Douches et bains oculaires d'urgence Stations de lavage de voitures/bus 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Le Health and Safety Executive ou HSE (services de santé et de sécurité) du Royaume-Uni a publié les directives suivantes : Legionnaires' disease. The control of legionella bacteria in water systems - Approved Code of Practice and guidance. Baptisées L8, ces directives sont destinées à servir de guide pour le contrôle de la bactérie legionella dans les systèmes à eau. Surveillance de l'eau de refroidissement Ce kit comprend les principaux paramètres à contrôler à une fréquence mensuelle/trimestrielle, selon les recommandations, afin de minimiser le risque de prolifération de la legionella et d'éviter qu'elle n'atteigne des niveaux critiques dans les systèmes de refroidissement à eau ouverts. Ce kit de test ne PERMET PAS de détecter la legionella elle-même, mais les conditions favorisant sa prolifération. Il est destiné à être utilisé pour des systèmes traités au chlore ou au brome (biocide oxydant). Contenu du kit : 1. Alcalinité M (test au goutte à goutte) 2. Brome (Comparateur) 3. Chlore (test au goutte à goutte) 4. Chlore (Comparateur) 5. Dureté calcique (test au goutte à goutte) 6. Dureté totale (test au goutte à goutte) 7. Fer LR (Comparateur) 8. pH (SD50) 9. Conductivité/MDT (SD70) 10. Température (SD70) 11. FTV/bactéries aérobies (lames gélosées) Remarques 1. Le conductimètre SD70 mesure également la température de l'eau chaude et froide. 2. Pour que les résultats soient parlants, il est essentiel que les conditions d'analyse soient identiques chaque semaine. Cela permet de dégager des tendances, de détecter une augmentation significative des niveaux de bactéries et d'agir en conséquence. En cas de variation des températures ou des temps de repos, les résultats ne pourront être comparés et aucune tendance ne pourra être dégagée. L'incubateur DI-10 Lovibond est un appareil basse tension compact pouvant contenir 12 lames gélosées et constituant un excellent instrument d'analyse complémentaire. 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Alcalinité M Plage : de 50 à 2400 mg/l (CaCO3) Prélever un échantillon conforme à la plage de valeurs attendue (voir tableau ci-dessous). Ajouter quelques gouttes de solution KS138 - TA4 (indicateur 4,5) pour obtenir une teinte bleutée. Compter le nombre de gouttes de KS139 - TA3 ou KS136 - PA2/TA2 à ajouter pour obtenir une couleur jaune/orangée. Noter le nombre de gouttes versées. La couleur peut varier selon l'échantillon et les conditions du test. Alcalinité totale (CaCO3) en mg/l = nombre de gouttes x facteur applicable (cf. tableau) ppm = mg/l Plage de valeurs attendue (mg/l) Solution titrante 50-150 100-300 200-600 200 – 600 400 – 1200 800 – 2400 Taille de l'échantillon (ml) 40 20 10 40 20 10 Facteur KS139 – TA3 5 KS139 – TA3 10 KS139 – TA3 20 KS136 - PA2/TA2 20 KS136 - PA2/TA2 40 KS136 - PA2/TA2 80 REMARQUE Le M désigne le méthylorange initialement utilisé pour le titrage de l'alcalinité totale. On utilise aujourd'hui l'indicateur 4,5, mais l'ancienne dénomination (M) a été conservée. Relations d'alcalinité Les différentes composantes de l'alcalinité, comme les substances caustiques, le carbonate et le bicarbonate libres, peuvent être déterminées à l'aide de la relation entre P et M (cf. tableau ci-dessous). Si P=0 P < M/2 P = M/ 2 P > M/2 P=M 56I014101 Version P1 OH 0 0 0 2P – M M CO3 0 2P 2P 2 (M – P) 0 HCO3 M M – 2P 0 0 0 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Brome (Total) Le bome est un biocide oxydant efficace pour le traitement de l'eau de refroidissement, à condition de surveiller soigneusement le pH. Contacter votre prestataire chargé du traitement de l'eau pour connaître les niveaux de concentration acceptables. Utiliser le test suivant pour contrôler et consigner cette concentration à une fréquence hebdomadaire. Le brome libre et le brome combiné ont tous deux une action biocide. Brome total (libe + combiné) • Remplir les deux tubes jusqu'au repère de 10 ml. Placer l'un des tubes dans la chambre de mesure de gauche du comparateur (tube témoin). • Ajouter une pastille de DPD n° 1 dans l'autre tube. Remuer jusqu'à complète dissolution de la pastille après avoir refermé le tube. • Placer ce second tube dans la chambre de mesure de droite du comparateur. Faire concorder les deux couleurs face à la lumière. • Relever le résultat obtenu en mg/l de brome total. 1 3 2 4 5 Remarque : Afin de supprimer toute trace de chlore éventuellement présente dans l'eau, ajouter une pastille de glycine DPD (non compris dans le kit standard) avant la pastille DPD n° 1. Écraser la pastille pour favoriser la dissolution. 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Plage : de 20 à 12 000 mg/l (Cl-) Chlorure Prélever un échantillon conforme à la plage de valeurs attendue (voir tableau ci-dessous). Ajouter 10 gouttes de solution Ajouter quelques gouttes de réactif KS140 – BC1/CC1 KS141 – BC2 ou KS142 – CC2. (chromate de potassium) pour obtenir une teinte jaunâtre. Noter le nombre de gouttes ajoutées jusqu'à ce que la couleur vire à l'orange/au marron. Ajouter une goutte à la fois, remuer après chaque goutte versée. La couleur peut varier selon l'échantillon et les conditions du test. Chlorure (Cl-) en mg/l = volume utilisé x facteur applicable (cf. tableau) ppm = mg/l Taille de l'échantillon Facteur (ml) 20 - 75 KS141 – CC2 40 2,5 50 - 150 KS141 – CC2 20 5 100 - 400 KS141 – CC2 10 10 100 - 400 KS142 – BC2 40 10 200 - 600 KS142 – BC2 20 20 400 - 1000 KS142 – BC2 10 40 800 - 3000 KS142 – BC2 5* 80 2000 - 6000 KS142 – BC2 2* 200 4000 - 12 000 KS142 – BC2 1* 400 *Diluer les échantillons de moins de 10 ml dans environ 10 à 20 ml d'eau distillée ou déminéralisée (exempte de chlorure). Plage de valeurs attendue (mg/l) Solution titrante REMARQUE 1 Neutraliser impérativement les échantillons alcalins tels que l'eau de chaudière avant l'analyse. Il n'est pas nécessaire de neutraliser l'eau de refroidissement au préalable. 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Chlore (libre et total) Le chlore est un biocide oxydant efficace pour le traitement de l'eau de refroidissement, à condition de surveiller soigneusement le pH. Contacter votre prestataire chargé du traitement de l'eau pour connaître les niveaux de concentration acceptables. Utiliser le test suivant pour contrôler et consigner cette concentration à une fréquence hebdomadaire. Chlore libre • Remplir les deux tubes jusqu'au repère de 10 ml. Placer l'un des tubes dans la chambre de mesure de gauche du comparateur (tube témoin). • Ajouter une pastille de DPD n° 1 dans l'autre tube. Remuer jusqu'à complète dissolution de la pastille après avoir refermé le tube. • Placer ce second tube dans la chambre de mesure de droite du comparateur. Faire concorder les deux couleurs face à la lumière. • Relever le résultat obtenu en mg/l de chlore libre. 1 3 2 4 56I014101 Version P1 5 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Chlore (libre et total) Suite Chlore total • Une fois le test de chlore libre effectué, prendre le tube préalablement placé dans la chambre de mesure de droite du comparateur. • Ouvrir le tube et ajouter une pastille DPD n° 3. • Refermer et renverser le tube jusqu'à complète dissolution. • Placer le tube dans la chambre de mesure de droite. • Attendre 2 minutes que la réaction soit complète. • Comparer les deux zones de couleur face à la lumière et relever le résultat en mg/l de chlore total. 1 3 5 2 4 6 Chlore combiné (mg/l) = chlore total – chlore libre • • Exemple : chlore total : 1,20 mg/l Donc : chlore combiné = 0,78 mg/l 56I014101 Version P1 et chlore libre : 0,42 mg/l (1,2 – 0,42) LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Dureté (calcique) Prélever un échantillon conforme à la plage de valeurs attendue (voir tableau ci-dessous). Plage : de 5 à 600 mg/l (CaCO3) Ajouter 4 gouttes de solution KS144 – CH2 (tampon de dureté calcique) pour un échantillon de 10 ml. Mélanger. Ajouter une pastille de KT143 – CH1 Compter le nombre de gouttes de KS162 – TH3 ou (indicateur de dureté calcique) KS145 – TH4/H/CH3 ou une quantité suffisante jusqu'à ce que de solution l'échantillon vire au bleu KP216 – CH1P pur. (indicateur de dureté Noter le nombre de calcique) gouttes versées. jusqu'à obtention d'une couleur rouge bordeaux après mélange. La couleur peut varier selon l'échantillon et les conditions du test. Dureté calcique (CaCO3) en mg/l = nombre de gouttes x facteur applicable (cf. tableau) ppm = mg/l 56I014101 Version P1 Plage de valeurs attendue (mg/l) Solution titrante 5 - 15 10 - 30 20 - 60 50 - 150 100 - 300 200 - 600 KS139 – TH3 KS139 – TH3 KS139 – TH3 KS139 – TH4/H/CH3 KS139 – TH4/H/CH3 KS139 – TH4/H/CH3 Taille de l'échantillon (ml) 40 20 10 40 20 10 Facteur 0,5 1 2 5 10 20 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Dureté (totale) Plage: de 5 à 600 mg/l (CaCO3) Prélever un échantillon conforme à la plage de valeurs attendue (voir tableau ci-dessous). Si l'échantillon contient plus de 1 mg/l de cuivre, lire la remarque 2. Ajouter 4 gouttes de solution Ajouter 4 gouttes de solution Compter le nombre de gouttes de KS160 – TH2 KS164 – TH5 (tampon de dureté totale) pour un échantillon de 10 ml. Mélanger. (indicateur de dureté totale) pour un échantillon de 10 ml ou une quantité suffisante de KS162 – TH3 ou KS145 – TH4/H/CH3 jusqu'à ce que l'échantillon vire au bleu pur. Noter le nombre de gouttes versées. KP283 – TH1P** (indicateur de dureté calcique) jusqu'à obtention d'une couleur rouge bordeaux après mélange. La couleur peut varier selon l'échantillon et les conditions du test. Dureté totale (CaCO3) en mg/l = nombre de gouttes x facteur applicable (cf. tableau) ppm = mg/l Plage de valeurs attendue (mg/l) Solution titrante 5 - 15 10 - 30 20 - 60 50 - 150 100 - 300 200 - 600 KS139 – TH3 KS139 – TH3 KS139 – TH3 KS139 – TH4/H/CH3 KS139 – TH4/H/CH3 KS139 – TH4/H/CH3 Taille de l'échantillon (ml) 40 20 10 40 20 10 Facteur 0,5 1 2 5 10 20 ** REMARQUE 1 Il est également possible d'utiliser une pastille KT326 – TH1 (indicateur de dureté totale) à l'étape 3. Ajouter une pastille par test SANS l'écraser. Remuer délicatement jusqu'à obtention d'une intensité de couleur adaptée, puis passer à l'étape 4. REMARQUE 2 Une teneur en cuivre supérieure à 1 ppm entravera le changement de couleur. Pour neutraliser l'interférence du cuivre, ajouter 1 goutte de KS63 – FE6 (thioglycolate) avant de verser le KS160 – TH2. 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Fer (LR) – de 0 à 1 mg/l (Fe) Le fer à l'état dissout est un indictateur clé de corrosion du métal (acier). Le test suivant permet de déterminer la teneur en fer totale. L'agent éducteur utilisé dans le cadre du test permet de re-dissoudre les fines particules ou le fer colloïdal. Pour obtenir le fer soluble, filtrer l'échantillon à travers un tamis de 0,45 µm. • Remplir les deux tubes jusqu'au repère de 10 ml. Placer l'un des tubes dans la chambre de mesure de gauche du comparateur (tube témoin). • Ajouter 10 gouttes de KS61 – FE5 (ferrozine/thioglycolate) dans l'autre tube. • Renverser le tube après l'avoir refermé. • Placer ce tube dans la chambre de mesure de droite. • Attendre 5 minutes que la coloration se produise. • Comparer les deux zones de couleur à la lumière du jour et relever le résultat en mg/l de fer (Fe). 1 3 5 Attendre 5 Minutes 2 4 6 Remarque : En présence de molybdate, l'échantillon vire à l'orange et non au pourpre. Dans ce cas, ajouter 10 gouttes de solution KS63 – FE6 (thioglycolate) dans le tube témoin. Fermer le tube. Mélanger et placer le tube dans la chambre de mesure de gauche Cette opération permet de compenser l'interférence du molybdate. 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Mesure du pH L'efficacité du biocide oxydant dépend du pH. Pour pouvoir contrôler correctement le pH de l'eau de refroidissement, il est essentiel de garantir une efficacité optimale du biocide. Guide de démarrage rapide : (Pour un descriptif détaillé des fonctions de l'appareil, se reporter au mode d'emploi fourni.) Appuyer sur cette touche pendant 3 secondes pour éteindre l'appareil. Appuyer sur cette touche pour conserver une valeur - (!) s'affiche sur l'écran LCD. Appuyer sur cette touche pour activer/désactiver le rétroéclairage. Appuyer sur cette touche pendant 3 secondes pour enregistrer les données. Au bout de 3 secondes, l‘emplacement mémoire est brièvement affiché sur l'écran (p. ex. 01). Lorsque la capacité maximale de la mémoire est atteinte, les fichiers les plus anciens sont écrasés. * Ré-étalonner régulièrement l'appareil pour conserver la précision des mesures. • Rincer l'électrode à l'eau distillée après chaque mesure. • Si la température est en dehors de la plage de valeurs, la mention "ERR" s'affiche. puis retour automatique au mode de mesure. * Si la valeur lue par défaut dépasse de plus de 30 % celle de la solution tampon standard, la mention « ERR » s'affiche. Calibrage : reconnaissance automatique des solutions tampon de pH 4 (L), pH 7 (M) et pH 10 (H). Calibrage un point 3 SEC. Tampon de pH 7 56I014101 Version P1 PATIENTER QUITTER Calibrage deux points 3 SEC PATIENTER QUITTER Tampon de pH 7 PATIENTER Tampon de pH 4 Calibrage trois points 3 SEC. PATIENTER Tampon de pH 7 PATIENTER PATIENTER Tampon de pH 4 PATIENTER = Attendre jusqu'à ce que l'icône du sablier ( 56I014101 Version P1 Tampon de pH 10 QUITTER ) disparaisse LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Bactéries aérobies L'analyse de l'eau à l'aide de lames gélosées est destinée à détecter une contamination microbiologique. Cette méthode est recommandée pour la surveillance de l'eau de refroidissement et permet de détecter la prolifération des bactéries aérobies. Une faible quantité de bactéries indique que les systèmes de contrôle du pH et les biocides utilisés sont efficaces. Une augmentation significative des résultats doit entraîner des mesures immédiates pour éviter que la prolifération n'atteigne des niveaux dangereux. L'eau de refroidissement est considérée comme « sous contrôle » si la valeur indiquée par la lame gélosée est inférieure ou égale à 104 UFC/ml. Remarques Certaines étapes fondamentales doivent être respectées pour obtenir des résultats parlants permettant d'évaluer l'efficacité des systèmes de contrôle. 1. Il convient de se laver soigneusement les mains pour éviter tout transfert de la lame gélosée. 2. S'assurer que la lame gélosée incube à la bonne témpérature est n'est pas exposée à une chaleur excessive pendant le temps d'incubation (les chocs thermiques entravent la prolifération bactérienne). 3. Veiller à ce que la température d'incubation reste constante pendant 48 heures. Utiliser l'incubateur DI-10. 4. Veiller à ce que le temps d'incubation soit le même chaque semaine, afin de pouvoir dégager des tendances. Incubateur portatif pour lames gélosées DI-10 56B000701 Un espace est réservé dans le kit pour l'incubateur DI-10 (non compris dans le kit standard). 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Procédure 1. Retirer la lame gélosée de son tube sans en toucher la surface. Immerger la lame dans le liquide ou la placer sous un écoulement constant de fluide. Les deux faces de la lame gélosée doivent être entièrement mouillées. La lame gélosée doit être en contact avec le fluide à analyser pendant environ 5 à 10 secondes. 2. Laisser s'écouler l'excédent de fluide de la lame . 3. Remettre la lame gélosée dans son tube et marquer ce dernier à l'aide des étiquettes fournies. 4. Placer la lame gélosée dans un incubateur à 30° C pendant 48 heures. 5. Au bout du temps d'incubation, retirer la lame du tube et comparer l'augmentation du point rouge sur les bandes gélosées avec les témoins de comparaison. 6. Utiliser une solution fortement javelisée pour stériliser les lames gélosées après usage avant de les jeter. Témoins de comparaison des bactéries 3 4 5 6 7 10 10 10 10 10 Remarques : les lames gélosées peuvent être conservées 6 à 9 mois. Idéalement, elles doivent être stockées à 15° C. Après utilisation, il convient d'incinérer, de stériliser à l'autoclave ou d'imprégner de désinfectant les lames gélosées pendant plusieurs heures avant de les jeter. 56I014101 Version P1 LEGIONELLA L8 (FRÉQUENCE MENSUELLE) Conductivité/MDT/Température (SD70) Le conductimètre SD70 est destiné à mesurer la conductivité de l'eau. Multiplier le résultat obtenu par 0,7 pour obtenir la valeur de matières dissoutes totales (MDT). La température s'affiche directement sur l'écran pendant la mesure du pH. Guide de démarrage rapide : (Pour un descriptif détaillé des fonctions de l'appareil, se reporter au mode d'emploi fourni.) Appuyer sur cette touche pendant 3 secondes pour éteindre l'appareil. Appuyer sur cette touche pour conserver une valeur - (!) s'affiche sur l'écran LCD. Appuyer sur cette touche pour activer/désactiver le rétroéclairage. Appuyer sur cette touche pendant 3 secondes pour enregistrer les données. Au bout de 3 s, le numéro de fichier apparaît brièvement à l'écran (01, p. ex.). Lorsque la capacité maximale de la mémoire est atteinte, les fichiers les plus anciens sont écrasés. * Ré-étalonner régulièrement l'appareil pour conserver la précision des mesures. * Rincer l'électrode à l'eau distillée après chaque mesure. * Si la température est en dehors de la plage de valeurs, la mention « ERR » s'affiche, puis retour automatique au mode de mesure. * Si la valeur lue par défaut dépasse de plus de 30 % celle de la la solution tampon standard, la mention « ERR » s'affiche. 56I014101 Version P1 Calibrage Détection automatique pour 1413 μS et 12,88 mS Appuyer sur la touche Cal pendant 3 secondes (CAL clignote sur l'écran LCD) Puis appuyer sur Attendre que la mention CAL disparaisse L'appareil est désormais calibré. Mouiller l'appareil avec une petite quantité d'échantillon d'eau puis plonger la sonde dans l'échantillon pour afficher la conductivité. 56I014101 Version P1