Biokar diagnostics Gélose glucosée Manuel utilisateur

Gélose glucosée prête-à-l’emploi
DOMAINE D’UTILISATION
La gélose glucosée permet la mise en évidence de la fermentation du glucose (avec ou sans
production de gaz) comme test d’identification des Bacillus cereus, des entérobactéries ou bien
des Pseudomonas, dans le cadre de l’application de méthodes normalisées : FIL Provisoire 181
(1998) pour le dénombrement de Bacillus cereus, ou bien ISO 21528-1 et -2 (2004) pour la
recherche et le dénombrement des Enterobacteriaceae, ou encore ISO/CD 13720 (2007) pour la
numération des Pseudomonas spp.
PRINCIPES
- La nutritivité du milieu est due à sa richesse en peptone de caséine, extrait de levure et
glucose.
- La fermentation du glucose se traduit par une acidification qui fait virer au jaune le pourpre de
bromocrésol (indicateur pH).
- Le chlorure de sodium maintient l’équilibre osmotique.
PREPARATION
- Avant utilisation, il est recommandé de faire fondre les tubes de gélose au bain-marie bouillant
pendant le minimum de temps nécessaire à la liquéfaction, et de laisser solidifier à nouveau en
bonne position.
- Ne pas répéter cette opération plus d’une fois.
MODE D’EMPLOI
- A partir d’une colonie suspecte prélevée sur un milieu d’isolement sélectif et purifiée sur gélose
nutritive, ensemencer le culot par piqûre centrale.
- Il est nécessaire d’utiliser des cultures pures prélevées au centre de colonies bien isolées,
sinon les réactions croisées rendent l’identification impossible à réaliser.
- Incuber à 37°C pendant 24 heures, capsules desserrées, de manière à favoriser les échanges
gazeux.
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Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France
Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr
LECTURE
Le milieu permet de mettre en évidence la fermentation du glucose :
•
•
Culot rouge : glucose non fermenté.
Culot jaune : glucose fermenté.
Les réactions typiques obtenues sont présentées dans le tableau suivant :
ESPECES
Fermentation du glucose
Salmonella
Shigella dysenteriae
Shigella flexneri
Shigella sonnei
Shigella boydii
Proteus vulgaris
Proteus mirabilis
Proteus morganii
Proteus rettgeri
Serratia marcescens
Enterobacter hafniae
Enterobacter aerogenes
Enterobacter cloacae
Escherichia coli
Citrobacter freundii
Klebsiella pneumoniae
Bacillus cereus
Alcaligenes faecalis
Pseudomonas aeruginosa (1)
Yersinia enterocolitica
(1)
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
quelques souches de Pseudomonas peuvent développer une coloration jaune,
due à l’oxydation du glucose, à la surface de l’agar.
FORMULE - TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
Pour 1 litre de milieu :
- Tryptone.........................................................................................10,0 g
- Extrait autolytique de levure ............................................................1,5 g
- Chlorure de sodium .........................................................................5,0 g
- Glucose..........................................................................................10,0 g
- Pourpre de bromocrésol ............................................................. 15,0 mg
- Agar agar bactériologique..............................................................12,0 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 7,0 ± 0,2.
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CONTRÔLE QUALITE
- Aspect, couleur : gélose violette.
- Réponse culturale typique après 24 heures d’incubation à 37°C :
Microorganismes
Escherichia coli
Salmonella Typhimurium
Bacillus cereus
Bacillus cereus
Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa
ATCC® 25922
ATCC 14028
ATCC 11178
ATCC 14579
CIP 82.118
ATCC 27853
Croissance
Fermentation du glucose
bonne, score 2
bonne, score 2
bonne, score 2
bonne, score 2
bonne, score 2
bonne, score 2
positive
positive
positive
positive
négative
négative
STOCKAGE / CONSERVATION
- Stocker entre 2 et 8°C, à l’abri de la lumière.
- La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.
PRESENTATION
Code
- Coffret de 50 tubes de 10 mL
BM09908
REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
FIL provisoire 181. Décembre 1998. Produits laitiers secs. Dénombrement de Bacillus cereus. Technique du nombre le
plus probable.
XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la
production des milieux de culture. Partie 2 : Guide général pour les essais de performance des milieux de culture.
NF ISO 21528-1 (V 08-039-1). Décembre 2004. Microbiologie des aliments. Méthodes horizontales pour la recherche et
le dénombrement des Enterobacteriaceae. Partie 1 : Recherche et dénombrement à l’aide de la technique NPP avec
préenrichissement.
NF ISO 21528-2 (V 08-039-2). Décembre 2004. Microbiologie des aliments. Méthodes horizontales pour la recherche et
le dénombrement des Enterobacteriaceae. Partie 2 : Méthode par comptage des colonies.
ISO/CD 13720. Février 2007. Viandes et produits à base de viande. Dénombrement de Pseudomonas spp.
Les mentions portées sur les étiquettes sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document.
Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2009-02-10.
Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BM099/F/2004-12 : 4.
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